外泌体对细胞系和宠物模型工具的干扰

室科学实验仅能证实横竖两室的有两种细胞系范围内仍然时有发生了物质装运递送，接下去来，借助外泌体追综软件测试这个ATM分泌的外泌体是否可以被脂肪细胞吸收。从ATM细胞提取外泌体，加上PKH26标签，添加到3T3-L1脂肪细胞培养基中，12h后，在细胞里面观察得到红色的带PKH26标签的外泌体。

外泌体对组织细胞和各种动物建模 的应响

已然印证ATM细胞分泌的外泌体能够转运miRNA到3T3-L1脂肪细胞，接下来可以把外泌体添加到细胞培养基或静脉注射到动物模型，观察表型。从肥胖小鼠ATM中提取外泌体，静脉注射到正常小鼠中，2周后，发现小鼠的葡萄糖耐受能力、胰岛素敏感性、葡萄糖输注率(GIR)、胰岛素刺激的葡萄糖代谢速率(IS-GDR)、肝脏糖产出量(HGP)和循环系统中的游离脂肪酸(FFA)都下降了，而瘦的小鼠来源的ATM-exo没有产生影响。表明肥胖动物的ATM细胞产生含miRNA的外泌体，在体内减弱胰岛素敏感性（图1）。将上述外泌体添加到多种细胞株的培养基中，24h后可观察得细胞胰岛素敏感性下降，与动物实验结果一致（图2）。

外泌体miRNA测序

    给定是外泌体中的miRNA发挥了**的作用，可到底是哪些miRNA呢，可以通过高通量测序寻找其中起着关键作用的分子。测序样本：瘦的ATM-exo VS 肥胖ATM-exo。测序获得的差异表达miRNA中，miR-155曾被报道通过**PPARγ，影响脂肪细胞分化，miR-155继续研究

miRNA的功能模块

3T3-L1脂质人体细胞系膜系转染miR-155 mimic后，人体细胞系膜系冬枣糖吸附量减低（图4）；敲除miR-155后人体细胞系膜系胰岛素兴奋的冬枣量吸附量提高；但胚胎植入骨髓后，miR-155重复表明，使人体细胞系膜系的冬枣糖吸附第三步减低（图5）。

（1）脂肪组织巨噬细胞分泌的外泌体miRNA可调节体内和体外胰岛素敏感性；

（2）脂肪组织巨噬细胞分泌的外泌体向胰岛素靶细胞传递miRNA；

（3）肥胖ATM外泌体**瘦小鼠引起胰岛素抵抗；

（4）瘦素ATM外泌体**肥胖小鼠改善胰岛素抵抗；

（5）肥胖ATM外泌体含有miR155，可引起胰岛素抵抗。