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β-乳球蛋白(β-LG)的聚乙二醇定点修饰产物及其抗原性变化

发布时间：2021-03-30 作者：axc 分享到：

牛乳敏感一种最常见的粮食敏感反映。在造成牛乳敏感反映的核蛋清酶中，β-乳球核蛋清酶（β-LG）被而言是注意的敏感原。用到共价淡化高水平调低β-LG抗原性终成为香港国际乳相关食品加工处理高水平理论钻研的。但最常见共价淡化有效途径如糖基化、磷硝化作用等随机数淡化，现实存在淡化位点进行性低、承载能力分析性不理想化、淡化副副产物相差太大甲等相关问题。理论钻研意味着β-LG抗原性还受线性网络表位和构象表位后果，共价淡化造成在各个位点会对核蛋清酶构象及抗原性生产各个后果。为清晰各个位点共价淡化对β-LG抗原性的后果，做到共价淡化对β-LG抗原性的管控，需用到选点淡化高水平以光催化原理均一化淡化副副产物。在PEG核蛋白呈现通用基团中，巯基因遗传其含碳量少成了PEG选点呈现中的很理想位点，目前为止对于β-LG巯基食用PEG选点呈现的鲜见简讯。从而β-LG第421位半胱氨酸（Cys121）分离巯基最靠近被97%人血清区分的关键性抗原表位肽段AA102-124中，分离巯基或者说探索不同的构建位点对β-LG抗原性影响力及进行β-LG致抗原性调整的关键性位点。

因此，针对β-LG Cys121游离巯基，选择5 kDa单甲氧基聚乙二醇-马来酰亚胺（mPEG-MAL）对其进行定点修饰（图1），以期获得高修饰率β-LG PEG定点修饰产物，并对修饰前后β-LG抗原性进行探究。

掩盖前后左右β-LG抗原性研究调查显现PEG突显能减低血清酶免役原性，显然本实验性经mPEG-MAL对β-LG Cys121游离子巯基指定地点突显后，β-LG-MAL抗原性**提供约25.9%，如同2表达。本创业团队前期工作利用PEG指定地点突显β-LG谷氨酰胺残基受到副产物β-LG-NH2，β-LG-NH2抗原性**减低59.04%；对β-LG的N-最末端氨基实行突显受到β-LG-ALD，β-LG-ALD抗原性**减低53.8%，该2 种位点突显使血清酶抗原性减低愿意都归纳法于PEG链这对血清酶的环境屏蔽掉功能，修饰了β-LG外面一些抗原取决簇。

图2

本实验英文性中，PEG的巯基定向装饰却没能因PEG链的屏弊使抗原性急剧下降，原因分析融合位点对β-LG抗原性的不良决定较PEG链的屏弊的功效更是**。β-LG中肽段AA41-46、AA102-124和AA149-163遵循要抗原表位，各用为92%、97%、89%的人血清辨认。实验英文性中Cys121游离于巯基隶属于被97%人血清辨认的通常抗原表位肽段AA102-124中，有时候在β-LG致敏性此外受规则化表位和构象表位不良决定，由于可能是装饰后原出于蛋白质内部组织的致敏位点爆漏，可能有新的构象致敏表位建立导致β-LG致抗原性**大幅提升。