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β-乳球蛋白(β-LG)的聚乙二醇定点修饰产物及其抗原性变化

发布时间：2021-03-30 作者：axc 分享到：

牛乳荨麻疹都是种通常的食品荨麻疹作用迟钝。在出现牛乳荨麻疹作用迟钝的球蛋白酶质中，β-乳球球蛋白酶质（β-LG）被以为是主要的的荨麻疹原。选共价表达技术设备设备设备大大减少β-LG抗原性不究为国家乳产品加工处理技术设备设备设备探索的。但经常用共价表达途径如糖基化、磷碱化等随时表达，都存在表达位点选性低、维持性不梦想、表达货物欠匀甲等故障。探索表达β-LG抗原性时受非线性表位和构象表位应响到，共价表达形成在有所各个位点会对球蛋白酶质构象及抗原性生成有所各个应响到。为清晰的成语有所各个位点共价表达对β-LG抗原性的应响到，完成共价表达对β-LG抗原性的调节，需选指定地点表达技术设备设备设备以准备均一化表达货物。在PEG血清绘制普遍基团中，巯基因遗传其分子量少成了PEG指定地点绘制中的满意位点，近些年真对β-LG巯基利用PEG指定地点绘制的鲜见消息。但会β-LG第221位半胱氨酸（Cys121）矿酸巯基处于被97%人血清快速精确的主要的抗原表位肽段AA102-124中，矿酸巯基或者说探究性与众不同融入位点对β-LG抗原性决定及达到β-LG致抗原性管控的关键性位点。

因此，针对β-LG Cys121游离巯基，选择5 kDa单甲氧基聚乙二醇-马来酰亚胺（mPEG-MAL）对其进行定点修饰（图1），以期获得高修饰率β-LG PEG定点修饰产物，并对修饰前后β-LG抗原性进行探究。

淡化前后的β-LG抗原性定性分析研究方案界面显示PEG绘制语能影响蛋清质免疫力原性，显然本实验报告经mPEG-MAL对β-LG Cys121游离于巯基定时绘制语后，β-LG-MAL抗原性**提高了约25.9%，长为2一样。本创业团队后期所采用PEG定时绘制语β-LG谷氨酰胺残基得以终产物β-LG-NH2，β-LG-NH2抗原性**越来越低59.04%；对β-LG的N-端部氨基进行绘制语得以β-LG-ALD，β-LG-ALD抗原性**越来越低53.8%，该2 种位点绘制语使蛋清质抗原性越来越低情况都唯物辩证于PEG链针对于蛋清质的范围屏幕的功效，遮盖住了β-LG外表一些抗原取决于簇。

图2

本测试中，PEG的巯基指定地点表达却未因PEG链的拦截使抗原性下跌，阐明结合在一起位点对β-LG抗原性的意义较PEG链的拦截意义更是为**。β-LG中肽段AA41-46、AA102-124和AA149-163为首要要抗原表位，分别为为92%、97%、89%的人血清面部认别。测试中Cys121徘徊巯基为于被97%人血清面部认别的首要抗原表位肽段AA102-124中，另外因β-LG致敏性与此同时受波形表位和构象表位意义，从而很有可能是表达后原占据蛋白质里面的致敏位点表露，并且有新的构象致敏表位产生造成β-LG致抗原性**完善。