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β环糊精修饰环形核酸适体(cb-apt-βCD)用于增强功能蛋白递送研究
发布时间:2021-04-15     作者:axc   分享到:

环形核酸适体(cb-apt)是一类化学工程的适配体,具有优良的稳定性和分子识别能力,但是它在方面的应用依然受到挑战。

我们设计了一种β环糊精修饰的环形核酸适体(cb-apt-βCD),它与分子剂通过主客体化学的超分子相互作用,实现细胞内货物的靶向递送。**将分子容器β环糊精,共轭到单链sgc8核酸适配体上(靶向细胞表面的蛋白质酪氨酸激酶(PTK7));接着用一个互补的单链进行环化形成cb-apt-βCD。与单体核酸适体相比,这种超分子系统具有高的血清稳定性且能增强细胞内货物的传递效率。这种环形核酸适体运载绿色荧光蛋白(GFP)的效率高达80%,运载的毒性蛋白-皂草素能细胞的生长。

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图1  cb-apt-βCD的合成路径、与金刚烷修饰的蛋白之间的超分子相互作用及其介导的增强蛋白递送的示意图。**将分子容器β环糊精,共轭到单链sgc8核酸适配体上;接着用一个互补的单链进行环化形成cb-apt-βCD。其不仅能保持环形核酸适体高度的血清稳定性,还能封装疏水性的小分子或者金刚烷修饰的蛋白,形成一个超分子系统,增强细胞内的递送。

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图2  按照DBCO共轭和无铜弹窗生理反应自动合成β环糊精淡化语的单链核酸适体。按照色谱仪色谱法剥离纯化能够得到β环糊精淡化语的单链核酸适体;回收利用相互依存链杂化联接建成cb-apt-βCD ,可由男变女聚丙乙烯酰胺妇科凝胶电泳声明。

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图3  将GFP为一款模试淀粉酶质,无机化学突显上金刚烷。使用TMR-apt-βCD 和GFP-AdA的荧光振动热量适当转移速度说明她们区间内演变成包涵络合物。次之这一种和好物在血清中能否高宽比平衡,为组织内淀粉酶质的运载打造了保证。

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图4  探析cb-apt-βCD介导GFP搭载进上皮人体细胞系的状态。根据皮秒激光共集焦上皮人体细胞系激光散斑工作和流式人体细胞术定性分析工作证明怎么写该结合物能很明显强化GFP的上皮人体细胞系递送,且搭载吸收率达到80%。

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图5  研究该复合物运载功能蛋白-皂草素进细胞的情况。通过MTT检测方法证实cb-apt-βCD具有增强功能蛋白运载效率的性质。


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