DSPE-PEG-NH2 与 COOH 的偶联反應经济条件讲解

DSPE-PEG-NH2（氨基装饰的聚乙二醇磷脂）是一个种多方面迅猛发展于脂质体装饰、动物素材外表面实用功能化、靶向治疗递送程序中的两亲性原子核。它由亲水的 PEG 链和亲脂的 DSPE（1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸无水乙醇胺）构造，PEG 尾端突显有氨基（–NH2）。那样氨基应该与都具有羧基（–COOH）系统团的碳原子进行酰胺键偶联的反应，体现组成定向生的共价突显。

一、反映基理简要

DSPE-PEG-NH2 与 COOH 的共价偶联体现是属于酰胺键的产生体现，实际上是羧酸与胺基在一定的能力下缩合绘制酰胺。该体现在生物体原材料和抗癫痫药物递送制度中采用比较广泛，通常包含两大类常用偶联方式英文：

EDC/NHS 活化法

CDI（碳二亚胺）法

二、较为常用响应体制与水平

1. EDC/NHS 纯化法（比较常见）

反响物：

DSPE-PEG-NH2（不能溶解 DMSO、DMF 或水）

羧基化分子结构结构（如小分子结构结构、核蛋白、缩聚物等）

EDC：1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺

NHS：N-羟基琥珀酰亚胺

不起作用关键步骤：

将带有 –COOH 的分子溶于 MES 缓冲液（pH 5.0~6.0）或无水有机溶剂（如 DMF/DMSO）中；

加入 EDC 与 NHS（摩尔比推荐 EDC:NHS:COOH = 2:2:1）激活羧基；

室温反应 15~30 分钟，生成中间活性酯（NHS-酯）；

入驻 DSPE-PEG-NH2，在 pH 7.4 必要条件下想法 4~12 时间；

透析、冻干或层析纯化乙酰乙酸。

想法氛围：

pH 6.0 激活，pH 7.2~7.5 偶联；

温度建议 20~25°C，避免高温降解。

液体：

有机体系：DMSO 或 DMF；

水溶体系：MES 或 PBS 缓冲液，需兼顾两者溶解性。

需要注意事由：

DSPE-PEG-NH2 先在无机相降解，再逐中滴加入活性液；

闭光反响，解决办法位置比较敏感氧分子挥发；

若制定目标团伙为食物可溶性有害物质，应制止无机溶液对其可溶性导致的导致。

2. CDI 法（碳二亚胺产甲烷羧酸）

原理：羧酸首先被 CDI 活化形成酰基咪唑中间体，随后与胺基缩合生成酰胺键。

优点：不需 NHS、无副产物、反应温和；

优点和缺点：对水的敏感，一半在无水坏境下对其进行。

关键步骤：

将羧基化分子溶于无水 DCM、THF 或 DMF；

加入 CDI（1.1~2 等摩尔），室温反应 1 小时；

加入到 DSPE-PEG-NH2；

室温或略加热（25–40°C）反应 6~12 小时；

纯化方式与 EDC/NHS 法相似。

三、后果症状转化率的条件

反应 pH：

羧基活性的阶段是需要微酸碱性；

胺基偶联阶段需要中性偏碱（pH 7.4~8.0）；

摩尔比：

为确保偶联效率，一般羧基与胺基摩尔比使用 1.2:1 或更高；

溶液使用：

水相更适合亲水小原子；

有机会相适宜疏水性树脂羧肌底物。

PEG 链长：

PEG2000 或 PEG3400 是常用规格，链长对水溶性和空间位阻有影响。

四、广泛应用具体方法

DSPE-PEG-NH2 与公开质酸（HA-COOH）偶联制作 HA-PEG-DSPE，适用于靶点肉瘤脂质体；

与小分子如叶酸、肽类的 COOH 偶联，用于制备靶向修饰纳米药物；

与壳聚糖具象化物偶联，采用化学合成阳阴正离子脂质体或染色体媒体。

五、汇总了

DSPE-PEG-NH2 与 COOH 体现是引入功用脂质体、怪物相匹配性纳米技术食材的必要进行。以 EDC/NHS 或 CDI 为惯用偶联形式，该表现在平稳條件下来进行，能高效、性价比最高变成比较稳定的酰胺键。根据监测表现條件（如 pH、容剂、的反应精力等）可改进劳动生产率和任务空间结构的删去，大量用在药物治疗递送、影像测试探针、接种疫苗递送等先进的生物工程医学专业范畴。