DSPE-PEG-NH2 与 COOH 的偶联反应迟钝的条件讲解

DSPE-PEG-NH2（氨基淡化的聚乙二醇磷脂）也是种比较广泛技术应用于脂质体淡化、生态学用料从表面功能键化、靶向治疗递送整体中的两亲性分子式。它由亲水的 PEG 链和亲脂的 DSPE（1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸甲醇胺）分为，PEG 后部装饰有氨基（–NH2）。这款氨基会与兼具羧基（–COOH）职能团的分子式情况酰胺键偶联化学反应，保证框架定位的共价绘制。

一、想法基本原理详述

DSPE-PEG-NH2 与 COOH 的共价偶联发生反應专属酰胺键的造成发生反應，其实质上是羧酸与胺基在需状况下缩合制成酰胺。该发生反應在菌物的原材料和药物治疗递送模式中APP广泛性，涵盖涵盖不同一般偶联办法：

EDC/NHS 活化法

CDI（碳二亚胺）法

二、经常用到化学反应体系建设与状况

1. EDC/NHS 碱化法（比较常见）

体现物：

DSPE-PEG-NH2（混溶 DMSO、DMF 或水）

羧基化团伙（如小团伙、淀粉酶、聚苯胺物等）

EDC：1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺

NHS：N-羟基琥珀酰亚胺

体现进行：

将带有 –COOH 的分子溶于 MES 缓冲液（pH 5.0~6.0）或无水有机溶剂（如 DMF/DMSO）中；

加入 EDC 与 NHS（摩尔比推荐 EDC:NHS:COOH = 2:2:1）激活羧基；

室温反应 15~30 分钟，生成中间活性酯（NHS-酯）；

倒入 DSPE-PEG-NH2，在 pH 7.4 情况下表现 4~12 每小时；

透析、冻干或层析纯化终产物。

不起作用工作环境：

pH 6.0 激活，pH 7.2~7.5 偶联；

温度建议 20~25°C，避免高温降解。

石油醚：

有机体系：DMSO 或 DMF；

水溶体系：MES 或 PBS 缓冲液，需兼顾两者溶解性。

主要地方：

DSPE-PEG-NH2 先要在有机的相析出，再逐加入适量入纯化液；

遮光反应迟钝，放到部位脆弱氧分子可降解；

若制定目标碳原子糊口物活力杂质，应解决充分萃取剂对其活力形成影晌。

2. CDI 法（碳二亚胺产甲烷羧酸）

原理：羧酸首先被 CDI 活化形成酰基咪唑中间体，随后与胺基缩合生成酰胺键。

优点：不需 NHS、无副产物、反应温和；

问题：对水敏感度，一般的在无水场景下参与。

具体步骤：

将羧基化分子溶于无水 DCM、THF 或 DMF；

加入 CDI（1.1~2 等摩尔），室温反应 1 小时；

加盟 DSPE-PEG-NH2；

室温或略加热（25–40°C）反应 6~12 小时；

纯化方式与 EDC/NHS 法相似。

三、印象反映速度的原因

反应 pH：

羧基活性阶段中，必须要 微弱酸性；

胺基偶联阶段需要中性偏碱（pH 7.4~8.0）；

摩尔比：

为确保偶联效率，一般羧基与胺基摩尔比使用 1.2:1 或更高；

容剂选：

水相非常适合亲水小原子核；

无机相是和疏水性聚氨酯羧基低物。

PEG 链长：

PEG2000 或 PEG3400 是常用规格，链长对水溶性和空间位阻有影响。

四、应用软件具体方法

DSPE-PEG-NH2 与合理质酸（HA-COOH）偶联配制 HA-PEG-DSPE，中用靶向药物肉瘤脂质体；

与小分子如叶酸、肽类的 COOH 偶联，用于制备靶向修饰纳米药物；

与壳聚糖衍化物偶联，应用于准备阳正离子脂质体或dna媒介。

五、归纳总结

DSPE-PEG-NH2 与 COOH 反映是建立职能脂质体、怪物相融性纳米级建材的首要方法。以 EDC/NHS 或 CDI 为适用偶联方式方法，该表现在温和性先决的条件下完成，能有效演变成稳定性高的酰胺键。根据国家宏观调控表现先决的条件（如 pH、液体、反响时候等）可改进产出率和受众形式的保持，大范围用来食用的药物递送、显像检测器、肺炎疫苗递送等前端生物学生物学研究方向。