DSPE-PEG2000-TCO 与 Tetrazine 修饰分子的偶联实验方案或构建脂质体修饰方法

下部是 DSPE-PEG2000-TCO 与含 Tetrazine（四嗪）官能团氧分子的偶联实验报告解决方案，适用性于构造 靶向药物脂质体、納米粒、漆层绘制网上平台等采用。 

实验名称

DSPE-PEG2000-TCO 与 Tetrazine-功能性原子的生态学正交偶联表现实验性 

一、实验目的

可以通过反式环辛烯（TCO）-四嗪（Tetrazine）生态学正交响应，将 DSPE-PEG2000-TCO 与含 Tetrazine 的小团伙、球氨基酸或荧光电极等参与迅速的、科学规范、特异形的共价偶联，引入靶向治疗功能性脂质涂料或纳米技术系统。 

二、材料与试剂

品牌	金桥铜业跨接线的截面积大小	表明
DSPE-PEG2000-TCO	≥95%，粉沫或2 mg/mL 悬浊液	脂质-高分子化合物物掩盖剂
Tetrazine 体现大分子（如 Tetrazine-荧光探头、Tetrazine-自适应体）	可混溶水或DMSO	应有亲丙烯酸乳液与目的识別意识
PBS保护液（pH 7.4）	1×，灭菌过虑	始终维持生理性反应迟钝区域环境
DMSO（以免要求）	分折纯	充分均匀溶解 Tetrazine 分子式
反渗透膜离心分离管（MWCO 10 kDa）	0.5 mL/2 mL	纯化化学反应生成物

 

三、实验步骤

① 反映预备将 DSPE-PEG2000-TCO 熔化分解于 PBS 或水里面，含量设置为：0.5–1 mg/mL将 Tetrazine-掩盖团伙溶于于 PBS 或者少量 DMSO 中（确定 DMSO 量不超出总体布局系的 5%）接摩尔比 1:1.2（TCO : Tetrazine）混后俩者② 表现要求温暖：25°C（环境温度）反映期限：15–60 多分钟的英文（通畅30多分钟的英文足够了）背光作业：TCO 和部门 Tetrazine 检测器对光敏感脆弱③ 物品纯化所采用 超滤膜离心式（10 kDa 虚报冒领） 的还原未表现的悬浮 Tetrazine 探头；可利用应用进几步纯化（如透析、SEC）或适用险遭脂质体在校园营销推广活动的环节之中所构建。 

四、结果表征（可选）

做法	的主要用途
紫外线-可以看到汲取光谱图（UV-Vis）	分辨探头是否能够成功的偶联
新动态光散射（DLS）	若应用在脂质体，论文检测比表面积发展
傅里叶红外光谱分析（FTIR）	手机验证共价键产生（自选）
荧光光谱仪或三维成像	若偶联荧光电极，能用的 于功能键认证

 

五、应用延伸

1. 倡导脂质身体表面面效果化：将 DSPE-PEG2000-TCO 融入到脂质体（与DSPC、蛋白质搅拌，复合膜水化法）但是加进 Tetrazine-模块团伙，间接在脂质表浅面反响加快偶联，必须促使，必须中高温2. 创建体细胞质标上检测器：将 DSPE-PEG2000-TCO 建立血神经细胞培植液，置入血神经细胞结构接着加盟 Tetrazine-荧光电极，就能符号受损细胞外壁 

注意事项

投资项目	提醒
遮光工作	TCO 和 Tetrazine 对光刺激性，建议大家闭光反响
无可温度过高	规避 >40°C，TCO 会化学降解
防止出现被氧化	可充氮保护，TCO 对氧也较神经敏感
可以适用物品	化合物提案当日实用或环境温度留存（-20°C）

 

相关反应背景

对此 TCO-Tetrazine 是一种 SPAAC（Strain-Promoted Inverse-Electron-Demand Diels–Alder Cycloaddition）；免催化剂的作用的作用剂，对活神经元、公司很友好；常见于nm原料呈现、核蛋白偶联、原位标签、口服药物递送。

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