DSPE-PEG-DBCO 与某叠氮分子式通过的制作而成实验室操作步骤
以下的是 DSPE-PEG-DBCO 与叠氮分子结构融合的原则鼠标单击生物制作而成实验设计具体步骤，实应用在水相标准中的偶联反映，如引入靶向治疗脂质体、微米食用的药物各种载体、或从表面掩盖村料。
一、响应说明（无铜鼠标点击 SPAAC 化学反应）
作用分类： 应力有利于叠氮-炔烃环暴击伤害（SPAAC）
核心反应：
DSPE-PEG-DBCO + R–N₃ → DSPE-PEG-Triazole-R
二、想要材料
1. 化学原料单质
化学物质 | 描述 |
DSPE-PEG2000-DBCO | 淘宝宝贝名：DSPE-PEG-DBCO，MW ≈ 2800 Da |
叠氮绘制原子核 R–N₃ | 如 N₃-染剂、N₃-适用体、N₃-糖、小原子核等 |
2. 高沸点溶剂与加载液（视应用软件取舍）
去正离子水、PBS（pH 7.4）、HEPES（pH 7.2–7.5）
DMSO（如叠氮原子难溶时，可极少量易溶于 DMSO）
三、试验部骤
工作步骤 1：备考不起作用风险管理体系
降解 DSPE-PEG-DBCO
将其溶解 PBS 或 HEPES 保护液中，溶度常为 1–5 mg/mL
若难溶可先不能溶解多量 DMSO，再稀释液至所必需比热容
溶水 R–N₃（叠氮化物）
若为小分子结构（如 N₃-糖/N₃-颜料），就直接不溶水或者量 DMSO
若为球蛋白或寡核苷酸，应在好保护液中可溶性高，溶于水的
步 2：反响混合物与孵育
按压尔比 1:1.2（DSPE-PEG-DBCO:R–N₃） 融合
高温或 37°C 的反应 2–4 时间
背光运行（如涉及面荧光探头）
实例：
DSPE-PEG-DBCO (100 μL, 2 mg/mL)
+ N₃-Cy5 (10 μL, 1 mM)
→ 混合型消耗量至 200 μL，PBS储存液中表现 2 小时候
环节 3：物品纯化
按照 R–N₃ 原子核高低选该用习惯：
原因 | 纯化方法步骤 |
小氧分子（Cy5,糖原） | 反渗透膜（Amicon 10–30 kDa） |
DNA/RNA, aptamer | 透析袋（MWCO 3.5–8 kDa） |
脂质体呈现 | 限速离心式、SEC 层析 |
整合物納米物体表层装饰后 | 离心法洗涤剂、透析 |
布骤 4：进行分析与检验
UV-Vis/NIR：监测站 DBCO 峰不见、新荧光峰添加
FTIR/质谱：验证三唑方形成
DLS、Zeta、电镜：于脂质体/奈米粒安全稳定量分析印证
普鲁士蓝染色生殖细胞术、共专注高倍显微镜：用作靶向治疗功能性查验（如含荧光活性染料）
四、主意特别注意
建设项目 | 建立 |
pH 掌握 | 意见实现在 7.0–7.4，避免出现极端天气耐酸碱 |
DMSO 含水量 | ≤10%，免得损害动物风险管理体系平衡性 |
没有铜离子液体剂 | 与 CuAAC 区别，SPAAC 不需溶剂的作用剂 |
以避免电离 | DSPE-PEG-DBCO 逃避长时期爆出于水里面 |
贮藏的条件 | DSPE-PEG-DBCO 意见 –20°C 干澡背光补充 |
五、典型案例实验设计统计资料选取（范例）
建设项目 | 值 |
DSPE-PEG-DBCO 储电量 | 2 mg（约 0.7 μmol） |
N₃-Cy5 含量 | 1.2 eq（约 0.84 μmol） |
生理反应的时间 | 2 小时内，温度 |
原料溶解度 | 95%以上内容（反渗透装置去掉解离染色剂） |
应用领域范本 | 建立靶向疗法脂质体，神经元激光散斑等 |
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