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fitc荧光染料激发发射波长是多少?Fitc的使用方法介绍!
发布时间:2025-05-23     作者:zhn   分享到:

fitc荧光纺织染料鼓励使用光谱是什么?Fitc采用形式分享!

FITC(Fluorescein Isothiocyanate,异硫氰酸荧光素)都是种原素且普遍选用的深绿色荧光染剂,在抗体阳性学、体细胞膜菌物学和菌物理学工作中被当做标记图片抗体阳性、球高蛋白、多肽、寡核苷酸等,于荧光显微镜、普鲁士蓝染色体细胞膜术(FACS)、ELISA和各样动物显像。

 

通常数据信息

汉语称呼:异硫氰酸荧光素

英语翻译缩略语:FITC

充分调动可见光波长(Ex):约 495 nm

使用主波长(Em):约 519–525 nm

荧光背景色:有机

碳原子量:约 389.4 Da(FITC-NH2);依靠于体现形态

混溶性:可混溶DMSO、DMF、少量出有机质高沸点溶剂;低水可溶

 

耐腐蚀格局与偶联原则

特点基团:异硫氰酸基(–N=C=S)

的作用逻辑:可与怪物团伙的伯胺(–NH₂)引发共价现象,选用于抗原、核氨基酸或多肽的标注。

 

软件业务领域

抵抗能力/球蛋白标出

FITC最常见于免疫力荧光测试(IF)或流式人体细胞人体细胞术(FACS)中标公示记一抗或二抗,便利侦测指标团伙的呈现与区域划分。

免疫印迹生殖细胞术

标识細胞外表面或胞内抗原,应用于細胞临床表现、凋亡阐述、抗逆性评定等。

荧光显微成相

可查重神经元或团体中抗原的固定和表答,依据FITC标出抵抗能力改变生态4g信号出现。

许多着色

与别的荧光活性染料(如TRITC、DAPI、Cy5等)结合使用于多短信通道影像实验操作。

DNA/RNA检测器标出

可与寡核苷酸拼接,用作FISH、混种杂交测试探针和qPCR探头开拓。

 

✅ 特点

软件非常广泛,具层面熟透的的使用体制

直接费用低,利于得到

与半数以上论文在线检测化兼容(如光学显微镜、普鲁士蓝染色、酶标仪等)

 

缺陷和考虑细节

光比较稳定能力差:易被日照时拆解,长时报光会發生荧光淬灭,需闭光进行

pH明感:荧光比强度受pH后果过大(在 pH 6.5~8.0 使用范围内较维持)

易电离:异硫氰酸基团对水敏感脆弱,应现配在用

荧光使用期限短:卫星信号连续性很差,沉重感合长时程跟踪三维成像

 

常考FITC研究物

ip产业物表现形式

用处与阐明

FITC-NHS

与伯胺(–NH₂)发应,惯用于抗原、蛋清记号

FITC-dextran

标出多糖,用来内吞实验所、膜透光性的检测

FITC-PEG

标出聚乙二醇分子式,增进水可溶、可靠性

FITC-avidin/streptavidin

与生物体素整体互相配合适用,营造的检测服务平台

 

与另外的健康荧光染色剂会比较

染剂

鼓励/导弹光波长 (nm)

光比较稳明确

显著特点

FITC

495 / 519

★★

直接费用低,易了解,光安稳性较强

Alexa Fluor 488

495 / 519

★★★★★

更强信息,更高的光平衡性

GFP(草绿色荧光核蛋白)

~488 / ~509

★★★★

隔代遗传简码形容型tag标签,适于活内部

 

抗原FITC图标的操作扼要流程图(NHS酯法)

溶解性FITC-NHS于DMSO(杜绝水)

将血清质不能溶解含碱储存液(如0.1 M NaHCO₃,pH 8.5)

按百分比申请加入FITC-NHS水溶液(基本上摩尔比是5~20:1)

闭光孵育1小

适用透析或妇科凝胶过滤清洁柱的还原游离态FITC

测试标志利用率(凭借光体积密度比OD495/OD280)

 

汇总

FITC 是种经典爱情、极有效率且第三产业的荧光染色剂,适合于种生物学标记符号试验。它的绿荧光的信号清楚、便于检则,但在日照和pH经济条件下需操控,非常适合短时间探究实验室和长规标注。