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fitc荧光染料激发发射波长是多少?Fitc的使用方法介绍!
发布时间:2025-05-23     作者:zhn   分享到:

fitc荧光纺织染料增加使用激发光谱有多少钱?Fitc安全操作方法步骤介绍书!

FITC(Fluorescein Isothiocyanate,异硫氰酸荧光素)是一个种经典英文且大量用的蓝色荧光染色剂,在表面抗原学、癌细胞核动物学和动有机化学工业学实验所中被平常标上表面抗原、球营养素、多肽、寡核苷酸等,用作荧光显微镜、流式细胞核术癌细胞核术(FACS)、ELISA和各种类型生物学成相。

 

常见企业信息

中文翻译简称:异硫氰酸荧光素

英文音标缩写英文:FITC

刺激光波波长(Ex):约 495 nm

火箭发射光的波长(Em):约 519–525 nm

荧光色:深绿色

大分子量:约 389.4 Da(FITC-NH2);依赖性于绘制表现形式

溶化性:可易溶于DMSO、DMF、一少部分充分高沸点溶剂;低水阴离子型

 

耐腐蚀结构类型与偶联体制

系统基团:异硫氰酸基(–N=C=S)

目的体系:可与生物制品原子的伯胺(–NH₂)产生共价想法,较常用于免疫抗体、淀粉酶质或多肽的符号。

 

广泛应用区域

抗原/淀粉酶标注

FITC经常使用于免役荧光检测(IF)或流式受损细胞受损细胞术(FACS)中标公示记一抗或二抗,更方便追综个人目标团伙的理解与区域。

流式細胞术細胞术

符号组织核面上或胞内抗原,广泛用于组织核基因分型、凋亡解析、吸附性考评等。

荧光显微显像

可检侧组织开展或组织开展中抗原的定位功能和表述,完成FITC符号表面抗原体现绿色的手机信号展示。

众多复染

与另外荧光有机染料(如TRITC、DAPI、Cy5等)组合公式于多通畅激光散斑科学试验。

DNA/RNA检测器标识

可与寡核苷酸接连,用作FISH、混种测试探针和qPCR电极发掘。

 

✅ 益处

软件应用广泛应用,还具有超高完善的用到标准

生产利润高,有利于了解

与绝大多数检测工具整体兼容(如高倍显微镜、流式细胞术、酶标仪等)

 

缺欠和注意力方式方法

光稳定性高能力差:易被光照强度被分解转换成,长时期曝光过度会会出现荧光淬灭,需阴凉操作的

pH敏感性:荧光硬度受pH的影响较多(在 pH 6.5~8.0 使用范围内较稳固)

易淀粉水解:异硫氰酸基团对水敏感性,应现配在用

荧光期短:手机信号坚持性比较差,身体不合适长时程监视激光散斑

 

较为常见FITC研究物

双重性物的形式

领域与阐述

FITC-NHS

与伯胺(–NH₂)发生反应,可用于抗体阳性、核蛋白箭头

FITC-dextran

标记图片多糖,中用内吞实验设计、膜细腻性检验

FITC-PEG

记号聚乙二醇分子式,延长水可溶、稳明确高性

FITC-avidin/streptavidin

与生态学素模式搞好团结食用,建立的检测游戏平台

 

与其他的红色荧光染剂有点

活性染料

提高/反射主波长 (nm)

光平衡性

特殊性

FITC

495 / 519

★★

利润低,易得,光稳定可靠性比较差

Alexa Fluor 488

495 / 519

★★★★★

更强信号灯,极高光动态平衡性

GFP(翠绿色荧光蛋清)

~488 / ~509

★★★★

基因遗传规律标识号展示型价签,比较适合活体细胞

 

免疫抗体FITC标示运行阐述流量(NHS酯法)

析出FITC-NHS于DMSO(制止水)

将蛋白酶质不溶是碱性的缓冲区液(如0.1 M NaHCO₃,pH 8.5)

按分配比例注入FITC-NHS氢氧化钠溶液(通常摩尔之比5~20:1)

遮光孵育1小时候

采用透析或凝胶的作用活性炭过滤柱删去游离态FITC

分析标记图片成功率(经过光导热系数比OD495/OD280)

 

整理

FITC 是种特色、高效益且经济发展的荧光染色剂,用来于多种类动物标注科学实验。它的墨绿色荧光手机信号明确、有利于判断,但在光线和pH生活条件下需调整,更适合短期计划观察植物研究和常规化箭头。