fitc荧光纺织染料增加使用激发光谱有多少钱?Fitc的安全操作方法步骤介绍书!
FITC(Fluorescein Isothiocyanate,异硫氰酸荧光素)是一个种经典英文且大量用的蓝色荧光染色剂,在表面抗原学、癌细胞核动物学和动有机化学工业学实验所中被平常标上表面抗原、球营养素、多肽、寡核苷酸等,用作荧光显微镜、流式细胞核术癌细胞核术(FACS)、ELISA和各种类型生物学成相。
常见企业信息
中文翻译简称:异硫氰酸荧光素
英文音标缩写英文:FITC
刺激光波波长(Ex):约 495 nm
火箭发射光的波长(Em):约 519–525 nm
荧光色:深绿色
大分子量:约 389.4 Da(FITC-NH2);依赖性于绘制表现形式
溶化性:可易溶于DMSO、DMF、一少部分充分高沸点溶剂;低水阴离子型
耐腐蚀结构类型与偶联体制
系统基团:异硫氰酸基(–N=C=S)
目的体系:可与生物制品原子的伯胺(–NH₂)产生共价想法,较常用于免疫抗体、淀粉酶质或多肽的符号。
广泛应用区域
抗原/淀粉酶标注
FITC经常使用于免役荧光检测(IF)或流式受损细胞受损细胞术(FACS)中标公示记一抗或二抗,更方便追综个人目标团伙的理解与区域。
流式細胞术細胞术
符号组织核面上或胞内抗原,广泛用于组织核基因分型、凋亡解析、吸附性考评等。
荧光显微显像
可检侧组织开展或组织开展中抗原的定位功能和表述,完成FITC符号表面抗原体现绿色的手机信号展示。
众多复染
与另外荧光有机染料(如TRITC、DAPI、Cy5等)组合公式于多通畅激光散斑科学试验。
DNA/RNA检测器标识
可与寡核苷酸接连,用作FISH、混种测试探针和qPCR电极发掘。
✅ 益处
软件应用广泛应用,还具有超高完善的用到标准
生产利润高,有利于了解
与绝大多数检测工具整体兼容(如高倍显微镜、流式细胞术、酶标仪等)
缺欠和注意力方式方法
光稳定性高能力差:易被光照强度被分解转换成,长时期曝光过度会会出现荧光淬灭,需阴凉操作的
pH敏感性:荧光硬度受pH的影响较多(在 pH 6.5~8.0 使用范围内较稳固)
易淀粉水解:异硫氰酸基团对水敏感性,应现配在用
荧光期短:手机信号坚持性比较差,身体不合适长时程监视激光散斑
较为常见FITC研究物
双重性物的形式 | 领域与阐述 |
FITC-NHS | 与伯胺(–NH₂)发生反应,可用于抗体阳性、核蛋白箭头 |
FITC-dextran | 标记图片多糖,中用内吞实验设计、膜细腻性检验 |
FITC-PEG | 记号聚乙二醇分子式,延长水可溶、稳明确高性 |
FITC-avidin/streptavidin | 与生态学素模式搞好团结食用,建立的检测游戏平台 |
与其他的红色荧光染剂有点
活性染料 | 提高/反射主波长 (nm) | 光平衡性 | 特殊性 |
FITC | 495 / 519 | ★★ | 利润低,易得,光稳定可靠性比较差 |
Alexa Fluor 488 | 495 / 519 | ★★★★★ | 更强信号灯,极高光动态平衡性 |
GFP(翠绿色荧光蛋清) | ~488 / ~509 | ★★★★ | 基因遗传规律标识号展示型价签,比较适合活体细胞 |
免疫抗体FITC标示运行阐述流量(NHS酯法)
析出FITC-NHS于DMSO(制止水)
将蛋白酶质不溶是碱性的缓冲区液(如0.1 M NaHCO₃,pH 8.5)
按分配比例注入FITC-NHS氢氧化钠溶液(通常摩尔之比5~20:1)
遮光孵育1小时候
采用透析或凝胶的作用活性炭过滤柱删去游离态FITC
分析标记图片成功率(经过光导热系数比OD495/OD280)
整理
FITC 是种特色、高效益且经济发展的荧光染色剂,用来于多种类动物标注科学实验。它的墨绿色荧光手机信号明确、有利于判断,但在光线和pH生活条件下需调整,更适合短期计划观察植物研究和常规化箭头。


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