PKH26荧光染料的化学结构与性质以及染色方法

1. 化学结构与性质

PKH26就是种黄色荧光颜料，生物式为C₅₉H₉₇IN₂，原子量为961.34。它就可以平稳地依照到体受损神经细胞系膜的脂质区域环境，发出了晶莹的黄色荧光，其培养激发光谱为551nm，发激发光谱为567nm。PKH26具备高脂可溶，就可以轻言可穿透体受损神经细胞系膜，对体受损神经细胞系毒副作用较小，荧光情况低，且不太会的影响体受损神经细胞系的日常顺利功能键。 

2. 应用领域

- 受损上皮人体神经元系系箭头与示踪：PKH26广用以休外和休内的受损上皮人体神经元系系箭头与示踪学习。它就能够与受损上皮人体神经元系系膜不稳搭配，演变成牢固的荧光箭头，导致箭头的受损上皮人体神经元系系在生长发育周期公式内都能稳定荧光数字信号。譬如，在受损上皮人体神经元系系转化和肉瘤样癌学习中，PKH26常用以箭头恶性肿瘤受损上皮人体神经元系系，利用受损上皮人体神经元系系擦痕测试或Transwell测试评估报告格式其转化和肉瘤样癌本事。- 生殖内部繁衍研究分析：PKH26能够用于的探测生殖内部繁衍。在生殖内部瓦解工作中，荧光程度会跟随着生殖内部的瓦解而逐步逐渐递减，标上荧光可人均分摊至3个子代生殖内部中。经过免疫印迹生殖内部仪，需要各不相同荧光程度的各不相同的探测出未瓦解生殖内部、瓦解做次、第二次、3次及多瓦解每一次的生殖内部。- 外泌体标出：PKH26还能够用于标出外泌体。外泌体是组织分泌出的很小囊泡，参与者组织间电力和病症会发生发展壮大。用PKH26标出外泌体，都可以钻研其在组织间的传输和效果。- 另外的广泛应用：PKH26还该用于研究分析上皮肿瘤细胞核吞灭反应、上皮肿瘤细胞核间膜的转到、抗原呈递、上皮肿瘤细胞核吸咐并且团队组织切片中的神经系统元转入。 

3. 染色方法

- 收储液提纯：将1mg PKH26熔化分解在1mL DMSO中，能够 1mM收储液。收储液建议大家在-20°C或-80°C阴凉永久保存，制止重复多次冻融。- 业务液调制：用无血清细胞核锻炼基或PBS按1:50或1:100希释储备量液，取得5-10μM的业务液。- 神经神经元染色剂：对待浮悬神经神经元，将神经神经元比热容设定为1×10⁶/mL，融入1mL做办公液，高温孵育10-44一秒钟，以后用PBS洗滌。对待贴壁神经神经元，将神经神经元的培养计划在盖玻片上，融入100μL做办公液，轻摇涉及神经神经元，高温孵育5-30一秒钟，再换的培养计划基洗滌。 

4. 优点

- 高不比较稳定量分析性：PKH26的荧光数据信息鲜亮且不比较稳定量分析，或许在长时刻留意和实验所中也是会受到荧光衰减而不良影响人体细胞追踪定位效用。- 不危害神经上皮细胞膜性能：标签后的神经上皮细胞膜依旧控制一切正常的动物学亲水性和性能，并不会打扰神经上皮细胞膜实验操作的结论。- 高迟钝度和特情人：PKH26会在很低的有机废气浓度下标示神经细胞，兼具高迟钝度和特情人。- 坚持下去的荧光数据信息：PKH26颜料并能与細胞膜不稳根据，记号細胞在植物生长过渡期内都能始终保持荧光数据信息，不用再之后染色剂。 

5. 注意事项

- PKH26微生物培养基为DMSO悬浊液，在高温时候会干固，必须要预热融掉后食用。- 着色办公液必须要现配在用，未能晚到配成，以逃避纺织染料淀粉水解和变质。- 复染环节中要求保持合适的孵育日子和的温度，以确保有机染料与神经细胞质的配合功效。- 洗衣机清洗进行应SEO优化，以事关既取除已有有机染料又不损毁細胞的机构和功效。 PKH26为那种高效性的组织膜标示纺织染料，以自身的高相对稳定量分析、低毒副作用或是坚持下去的荧光信号灯，在组织微分子生物学、临床探索或是用量递送等域具备着范围广的运用未来。

 

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