您当前所在位置:首页 > 资讯信息 > 学术前沿
Cy5-DOPE在细胞膜荧光示踪中的应用与特性分析
发布时间:2025-07-09     作者:kx   分享到:
文献资料:具PD-1膜核蛋白的重构混杂神经细胞外囊泡使用胞质物货车辆跳转://www.mdpi.com/2072-6694/14/11/2635小编:石川拉贺†奥西德,吉田章介‡,泽田新一,佐佐木义弘和秋吉一成*节选:用料杆状宏病毒表明系统中常常用的秋粘虫Spodoptera frugiperda的Sf9动物神经细胞核系购自Invitrogen集团公司(美加利福尼亚州沃尔瑟姆)。HeLa神经细胞核购自JCRB Bank(欧美探析生物工程資源收藏中,欧美大阪)。 1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱 (DOPC)、1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸- L -丝氨酸 (DOPS)、1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸工业工业甲醇胺- N -(菁 5) (Cy5-DOPE)、1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸工业工业甲醇胺- N -(7-硝基-2-1,3-苯并恶二唑-4-基) (NBD-DOPE) 和 1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸工业工业甲醇胺- N -(丽丝胺罗丹明 B 磺酰基) (Rho-DOPE) 均购自 Avanti Polar Lipids (Alabaster, AL, USA)。脂质机制备将DOPC、DOPS、NBD-DOPE、Rho-DOPE和Cy5-DOPE以其他的摩尔比在窗玻璃微管内的氯仿中相溶。在流失的氩气下化掉溶液,导致脂质膜。将膜移至涡流潮湿器中一晚,以完整避开氯仿。加如250 µL加载液(20 mM CH3COOH/CH3COONa(pH 4.5)或10 mM Tris-HCl(pH 7.5))使膜水合,并在27 °C下孵育一晚。用到徵型抽出机(Avanti Polar Lipids)将浮动液抽出100 nm钻孔大小的聚氨酯膜。用到磷脂C测试软件(Wako,印度大阪)旋光度的测试脂质质量有机废气浓度。简来讲之,磷脂酶D和胆碱硫化物酶从磷脂样件中形成过硫化物氢。形成的过硫化物氢在过硫化物物酶的效用下推进N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺(DAOS)与4-氨基安替比林發生缩合现象,产生蓝色系有机颜料,依据旋光度的测试该有机颜料的吸光度,最后旋光度的测试样件中的磷脂质量有机废气浓度。

Cy5-DOPE

三维成像流式神经细胞术神经细胞术PD-1 EVs 用 5- 或 6-( N-虎珀酰亚胺氧羰基)荧光素 3′,6′-二乙酸酯 (CFSE)染色剂。将 CFSE 生成到 PD-1 EVs 悬浮物液中,使其终氧化还原电位为 62.8 µM,如果在 37 °C 下孵育 30 min。为了让消除游走的 CFSE,施用 100,000 NMWL Amicon 超离心力吸附器(Merck Millipore,法国马萨诸塞州伯灵顿)洁净标志的 PD-1 EVs。以 100:100:1 的 DOPC、DOPS 和 Cy5-DOPE 摩尔比制作脂质体。将 CFSE PD-1 EVs(5 µg/mL)和 Cy5 脂质体(1 µM)在酸碱性或弱酸性先决条件下深度融合,并在 27 °C 下孵育 30 min。能够 建立与化学表现氢氧化钠溶液等容积的pH 7.5减慢液中止深度融合化学表现。PD-1杂合胞身体膜能够 100nm直径的膜挤出来。施用ImageStream x MkII(Merck Millipore)数据提取PD-1杂合胞身体膜的多光谱阐述图片。二氧化碳激光最大功率设为为*大值(488nm:200mW;642nm:150mW;785nm(侧向散射):70mW)。荧光电磁波在通路2(CFSE)或通路5(Cy5)中获得。通路1和通路6分为设为为明场和侧向散射。在40倍缩放陪数下数据提取10,000个物体的荧光承载力,并施用IDEAS 6.2工具确定阐述。兰州pg电子娱乐游戏app 动物保证有关的货品:cRGD(c[RGDfK])-PEG-DSPEcRGD-PEG-SHRVG29-PEG-DSPEVIP-PEG-DSPEm-PEG8-DSPEDSPE-Fluorescein/DSPE-FITCDSPE-PEG-CHEMS这好的文章相关内容源于各种杂志期刊或论文,如果有知识产权侵权请结合企业全部删除!