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发布时间:2025-07-17     作者:zyl   分享到:

FITC(Fluorescein Isothiocyanate)是一种广泛使用的荧光染料,是荧光素(Fluorescein)衍生的异硫氰酸酯活性化合物,具有良好的荧光性质和反应活性,常用于标记蛋白质、多肽、抗体、氨基寡核苷酸等含胺类生物分子。

FITC 也是种翠纯天然荧光纺织染料,在刺激光波长约为495 nm(蓝光刺激)时可试射520–530 nm的翠纯天然荧光,具有着高量子产出率和好的激光散斑比对度,是荧光标记图片和激光散斑行业的经典传奇生产工具大分子。

常用名荧光素

英文名fluorescein

CAS号518-45-6

分子量332.30600

分子式C20H12O5

熔点N/A

FITC

结构特性

FITC是荧光素的异硫氰酸酯衍生物物,之中异硫氰酸酯基团(–N=C=S)拥有其与伯胺(–NH₂)发生想法的专业能力。类似这些发生想法常见在偏碱的条件(pH 8.0~9.0)下参与,可与氨基建成稳固的硫脲键,然而完成氧分子的共价记号。FITC有哪几种异构体:5-FITC 和 6-FITC,这当中5-FITC是较常用的异构体,也常对于标准单位实验试剂消售。商业性上展示 的“FITC”一般说来是5-FITC和6-FITC的交织物。


反应活性与标记机制

FITC中的异硫氰酸酯基团可与伯胺类团伙较快的症状,在性情温和情况下造成固定的硫脲键。这使其作为标上蛋清质、免疫抗体和寡核苷酸的比较好使用。该的症状方法操作简单提高效率,最常用缓解液为碳酸氢盐缓解液(pH 8.3)或磷酸二氢钠缓解液(PBS,缓解至是碱性的)。标记图片进行后,一般是应该透析、疑胶过滤器或HPLC等方法彻底清除未体现的FITC游离子染剂,以缩减视频背景讯号。


主要应用领域

免疫荧光染色(Immunofluorescence, IF)
FITC可用于标记抗体,用于检测细胞或组织中的特定靶标。由于其绿色荧光信号清晰明亮,可被多种荧光显微镜检测系统识别。

流式细胞术(Flow Cytometry, FACS)
FITC标记抗体广泛用于流式细胞术中,用于检测细胞表面或胞内蛋白,便于实现细胞亚群分析或细胞活性评估。

蛋白质/多肽标记
FITC常用于标记酶、激素、受体、细胞穿膜肽等,用于追踪其生物分布和作用机制。

细胞追踪和示踪实验
通过FITC标记的物质可用于研究细胞的吞噬、摄取、转运、跨膜过程等。

荧光探针和传感器构建
FITC经常用于合成荧光比率探针或用于检测离子、pH、酶活性的传感系统。


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