Cy5-Protein A,花菁素CY5-蛋白A的合成路线
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合成与纯化
合成视频自驾路线:
Protein A纯化:经由完美重现剂(如DTT)打開Protein A的二硫键,裸漏半胱氨酸残基(如果需要马来酰亚胺标出)。或马上适用赖氨酸残基(pH 8.0-9.0条件下)与Cy5-NHS酯反應。Cy5标示:Cy5-NHS酯与Protein A的氨基(赖氨酸ε-NH₂)生理反应,产生平稳酰胺键。症状标准:PBS(pH 7.4),室内温度,1-2钟头,闭光。纯化:凭借脱盐柱(如Zeba Spin)洗去未表现Cy5,或凭借长宽排阻色谱(SEC)拆分标识物品。饱和度标准:>95%(HPLC或SDS-PAGE检查)。根本技术指标:
标出度(Dye:Protein ratio):一般来说为1:1至3:1,过高标签概率产生Protein A构象改善,减少IgG配合工作能力。荧光量子产出率:标注后Cy5的量子劳动生产率应≥0.2(独立Cy5约为0.28),确认走势程度。企业企业可出具各种相关的个性定制车辆,比如必须 ,请咨讯,感谢!


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