英文名称:Ac-Asp-Glu-Val-Asp-AFC
中文名称:乙酰-天冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天冬氨酸-7-氨基-4-三氟甲基香豆素
乙酰-天冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天冬氨酸-7-氨基-4-三氟甲基香豆素(Ac-Asp-Glu-Val-Asp-AFC,名字简称Ac-DEVD-AFC)是一种种荧光标识的四肽底物,专门于检验半胱天冬酶-3(Caspase-3)及Caspase-7的酶特情人。其形式中,N端乙酰基(Ac)控制肽链分解,天冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天冬氨酸(DEVD)回文序列为Caspase-3/7的特情人切除器位点,pc端7-氨基-4-三氟甲基香豆素(AFC)是荧光基团,在未被切除器时共轭形式荧光较强,酶切后挥发释放游离子AFC,其荧光标准(培养吸光度400 nm,发射卫星吸光度505 nm)可观增进,可采用荧光分光光度计或细孔板看书器参考值检验。Caspase-3/7是血体血细胞凋亡下达关键时期的管理的本质淀粉酶酶,其渗透性变换可凸显凋亡讯号通道的更改密码的情形。Ac-DEVD-AFC进行供给高流畅度的荧光检查科技手段,成為论述血体血细胞凋亡措施的根本方式。列举,在中枢神经末梢退行性传染性传播疾病三维模型中,可进行在线测量脑结构匀浆中Caspase-3/7对Ac-DEVD-AFC的分割渗透性,考核中枢神经末梢元凋亡阶段;在药物剂量致癌性评估中,该底物可以用于检查无机化合物有无进行分析凋亡诱发血体血细胞阵亡。Ac-DEVD-AFC的的使用需网站优化科学实验前提以增进确切性。举例子,反响缓解液需带有正确溶液浓度值的DTT以保证酶亲水性,而且防止过高溶液浓度值电磁干预荧光查重;反响温差(一般性37℃)马上间需选择模板类别懂得调整,以确保安全荧光预警与酶亲水性呈曲线干系。不仅而且,需根据使用特情人克药制剂(如Ac-DEVD-CHO)验正预警特情人,除掉的血清酶的电磁干预。阶段,Ac-DEVD-AFC已很广应用于细胞核怪物学、药学学及方面的问题学探析,为定义凋亡相应疫情的原子机能提拱了关键所在技艺支柱。

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