英文名称:Ac-YVAD-AMC
中文名称:乙酰-酪氨酸-缬氨酸-丙氨酸-天冬氨酸-7-氨基-4-甲基香豆素
Ac-YVAD-AMC都是种荧光符号的四肽底物,专门于监测半胱天冬酶-1(Caspase-1)的酶催化活性。其节构中,N端乙酰基(Ac)保证肽链不受吸附;酪氨酸-缬氨酸-丙氨酸-天冬氨酸(YVAD)字段为Caspase-1的特异形切位点;电脑端7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)充当荧光基团,在未被切时共轭节构荧光薄弱,酶切后发挥游离态AMC,其荧光承载力(增进可见光光的波长380 nm,导弹发射可见光光的波长460 nm)有效不断增强,可在荧光分光光度计或微孔过滤板阅读赏析器按量监测。Caspase-1在细菌感染反應中充分发挥核心区反应,其特异性氧变动与三种细菌感染性症状(如类风湿骨痛依然能炎、细菌感染性肠病)融洽首要性。Ac-YVAD-AMC可以进行给出高灵活度的荧光查测技术,是探讨Caspase-1职能的首要工貝。诸如,在四核cpu体肿瘤细胞系或巨噬体肿瘤细胞系兴奋工作中,可可以进行在测量体肿瘤细胞系裂解液中Caspase-1对Ac-YVAD-AMC的激光切特异性氧,分析评估细菌感染小体(如NLRP3)的系统激活形态;在口服药物建立中,该底物适用于查测类化合物什么情况下可以进行控制Caspase-1特异性氧缩减细菌感染系数(如IL-1β)的放。施用Ac-YVAD-AMC时候需要的提升验测状态以的提升为准性。发应缓存液需富含尽量氨水溶液浓度的DTT以达到酶活力,的同时避免出现过高氨水溶液浓度电磁波辐射荧光验测;发应环境温度(常见37℃)尽早间需要根据样本量类型的更改,以加强组织领导荧光数据移动信号与酶活力呈线型社会关系。于此,需采用插入活性聊天限注射剂(如Ac-YVAD-CHO)核实数据移动信号活性聊天,去掉其它蛋白质酶(如Caspase-4/5)的电磁波辐射。当下,Ac-YVAD-AMC已大范围适用于内部微生物、免疫检测学及临床药理学实验,为正确理解细菌感染相关内容发病的碳原子缘由供给了重中之重的技术支撑架。

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