FITC-Biotin,异硫氰酸荧光素标记生物素的反应条件
产品名称:FITC-Biotin,异硫氰酸荧光素标记生物素的反应条件
一、化学结构与组成
1. 化学物质格局FITC(异硫氰酸荧光素):团伙式:C₂₁H₁₂NO₅S,团伙量约389.4 g/mol。工作:提高精彩纷呈荧光(刺激主光波长495 nm,试射主光波长519 nm),广泛用于荧光标注。生物技术素(Biotin):大分子结构式:C₁₀H₁₆N₂O₃S,大分子结构量约244.31 g/mol。技能:与亲和素/链霉亲和素高感染力紧密结合(Kd≈10⁻¹⁵ M),变现靶点鉴别。衔接办法:FITC的异硫氰酸酯基团(-N=C=S)与海洋生物素的氨基不起作用,生成比较稳定的硫脲键(-NH-C(=S)-NH-)。全局原子核式:C₄₂H₅₀N₆O₈S₂,原子核量约831.02 g/mol(含接触臂)。2. 设计提醒图Biotin-NH₂ + FITC-N=C=S → Biotin-NH-C(=S)-NH-FITC二、合成方法
1. 现象标准步聚:生态学素融化在弱碱保护液(如PBS,pH 7.4)中。入驻FITC,恒温不良反应2-4小时左右。影响式:Biotin-NH₂ + FITC-N=C=S → Biotin-NH-C(=S)-NH-FITC + H₂S↑。首要参数值:pH值:7-9(弱偏碱性区域带动氨基生理反应)。温度表:恒温(25℃)反响,预防高温高压导至荧光淬灭。摩尔比:FITC与动物素的摩尔比往往为1:1至2:1,以平衡性标上成功率与终产物纯净度。2. 纯化方式方法透析:适用虚报冒领氧分子量3.5 kDa的透析袋,删去未反应迟钝的FITC和副货物。抑菌凝胶吸附色谱:如Sephadex G-25,进一个步骤纯化的目标有机物。企业企业可具备相关的的自定义的产品,如果发现需求,请顾问,谢谢您!