Cy5.5-Protein A,花菁素染料cy5标记蛋白A的操作步骤
成产品名稱:Cy5.5-Protein A,花菁素染色剂cy5记号淀粉酶A的操控部骤操作流程之一步骤之一Protein A注意:将Protein A盐溶液(1 mg/mL)用PBS(pH 7.4)透析住宿,的还原不确定性悬浮物。Cy5.5-NHS容解:将Cy5.5-NHS金属粉易溶于无水DMSO(10 mg/mL),背光保存文档(Cy5.5-NHS在一般的水都易电离)。箭头症状:将Cy5.5-NHS液体逐加入适量入Protein A液体中(Cy5.5-NHS:Protein A=5:1摩尔比),悄悄地混匀。常温背光混和1h(或4℃一晚,想法更柔和)。终结反应迟钝:加如10 μL 1 M Tris-HCl(pH 8.0)淬灭未不良反应的Cy5.5-NHS(Tris的氨基可角逐性组合Cy5.5-NHS)。纯化:凝露过虑层析:选择Sephadex G-25柱,以PBS为分子运动相,拆分Cy5.5-Protein A与未不良反应的Cy5.5-NHS。透析:将反应迟钝液装进透析袋(MWCO 10 kDa),对PBS透析3次(每每4钟头),快速清理小碳原子沉渣。质量浓度检验:Bradford法:核查Protein A酸度(A₅₉₅)。红外光谱仪光谱仪法:A₆₇₅(Cy5.5)/A₂₈₀(Protein A)相对分子质量统计标上率。范本:若A₆₇₅=0.8,A₂₈₀=1.0,则标出比重≈4 Cy5.5/Protein A。温磬提醒:仅用做科学研究,没有用做人体健康研究!wyh