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Cy5.5标记β2微球蛋白,Cy5.5-β2-microglobulin的合成及纯化过程
发布时间:2025-08-07     作者:axc   分享到:
Cy5.5标出β2微球血清,Cy5.5-β2-microglobulin的合成视频及纯化环节β2-微球血清(β2-microglobulin,β2-MG)都是种轻链血浆血清,碳原子量约11.8 kDa,是内主要的免疫系统设定细胞。Cy5.5图标β2-微球血清的合成视频及纯化全过程有关高效性偶联、纯化脱离和品质加测,确保安全才能得到型式完美、功能键催化活性的图标有机物。人工的过程配料做好准备:高溶化度β2-MG核蛋清溶化于缓存数据液(如PBS,pH 8.0),保障核蛋清不稳性。Cy5.5-NHS酯不溶无水DMSO中分离纯化保障液。偶联现象:以应适当摩尔比(如1:2至1:5,蛋白酶:活性氧染料)将Cy5.5-NHS酯缓缓滴入至β2-MG液体中,的反应迟钝在4℃至恒温下缓缓晃悠,事件约2–4个钟头。的反应迟钝导电介质pH稳定在8.0左右侧以确保氨基的活性氧。发应生理机制:Cy5.5-NHS酯与β2-MG的赖氨酸残基ε-氨基突发亲核代替,构成安全稳定酰胺键,变现荧光符号。该具体步骤暂时无法催化氧化剂,前提条件无刺激,可以有效防止蛋白酶变形。不良反应终结:加进甘氨酸等散布氨基材料全封闭未发应的NHS酯,防范之后发应,可靠标记图片物质。纯化的过程透析或凝胶的作用净化:用于透析(MWCO 3-10 kDa)或妇科凝胶过滤程序柱(如Sephadex G-25)剔除解离未症状活性染料和小碳原子沉淀物,换取粗纯品。科学规范色谱仪色谱(HPLC)纯化:进这一步用反相HPLC(RP-HPLC)纯化,进行C18柱,等度冲洗掉(乙腈-水,含进样器TFA)破乳标识血清与未标识血清及副乙酰乙酸。监控光波波长设为280 nm(血清)及675 nm(Cy5.5),核对纯品峰。纯品自身及精提:汇集最终目标峰,冷冻熟食缺水得以纯高、固定的Cy5.5-β2-MG固态物生成物。质量管理控制质谱研究:判断箭头大分子量与策略值缝合,手机验证偶联非常成功。UV-Vis和荧光光谱分析:加测Cy5.5的溶解峰和荧光导弹,分析纺织染料活力和偶联利用率。SDS-PAGE及免疫细胞痕印:验正球蛋白系统性和标记图片环境。

产品名称:Cy5.5标上β2微球球蛋白,Cy5.5-β2-microglobulin

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Cy5.5-β2-microglobulin

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