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Cy5.5-phosphoramidite,CY5.5标记亚磷酰胺的反应步骤
发布时间:2025-08-08     作者:axc   分享到:

Cy5.5-phosphoramidite,CY5.5标记亚磷酰胺的响应环节

Cy5.5-Phosphoramidite是一种基于近红外荧光染料Cy5.5的亚磷酰胺衍生物,主要用于核酸合成中引入荧光标签,便于荧光检测与分子追踪。亚磷酰胺化学作为固相寡核苷酸合成的核心步骤,涉及具有高反应活性的亚磷酰胺基团与核苷酸的羟基反应,形成磷酸酯键。将Cy5.5染料修饰于亚磷酰胺骨架,可实现荧光功能的核酸合成标记。

生理反应装修标准与底物Cy5.5-Phosphoramidite使用于固相合出视频操作系统,其症状对方为徘徊5'-羟基的核苷酸或呈现核酸。合出视频应该在惰性气体(如N2或氩气)中实行,放置亚磷酰胺基团被的水分淀粉水解。反响石油醚与条件化学影响多在无水有机的液体中对其进行,如无水的二氯二氧化氮(DCM)、乙腈(ACN)或二甲基甲酰胺(DMF)。恢复化学影响组织体制大量空气干燥,防止水分侵入出现的亚磷酰胺溶解,减少劳动生产率。高温往往掌控在温度(20–25℃),以保持亚磷酰胺的活性酶类和核苷酸的稳固性。响应具体步骤将Cy5.5-Phosphoramidite与5'-羟基的核苷酸固相适用物碰到,在崔化剂(如四乙基胺盐或二苯基磷酰氯)协助下,亚磷酰胺基团碱化并与羟基会发生亲核增加响应,转换成磷酸三酯键。不起作用用时通常为1-8分钟,有效且有效,事关链连通的精准的性。反映已完成后,申请加入空气强钝化剂(如碘硫酸铜溶液)空气钝化磷酸三酯成更紧定的磷酸酯节构。体现调控原则无水坏境:反应迟钝中所有水量均可呈现亚磷酰胺淀粉水解,呈现副终产物,大幅度降低分解成速度。崔化剂和阳极氧化作用的取舍:维持作用取舍性和物质稳定量分析性,崔化剂含量需精确性控住。发生反应时段与工作温度:掌握制成阶段,解决染剂或核酸生物降解。纯化处理:分解成后运用高效益液质色谱(HPLC)纯化,我们要除未反映物和副产品。光学反应与有机化学不稳性

产品名称:Cy5.5-phosphoramidite,CY5.5标示亚磷酰胺

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Cy5.5-phosphoramidite

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