Sulfo-CY3-MAL,磺化CY3-马来酰亚胺的使用方法
產商品称呼称:Sulfo-CY3-MAL,磺化CY3-马来酰亚胺的实用技巧使用的技术标上前打算:对象分子结构正确处理:血清质:抓好对象血清含自由巯基(如还原系统型谷胱甘肽整理裂开二硫键)。多肽/核酸:随时运用巯基突显的多肽或核酸(需查验突显效果)。降低液取舍:建议缓解液:PBS(pH 7.4)、HEPES(pH 7.0)或Tris-HCl(pH 7.5),防范含还原系统剂(如DTT、β-巯基甲醇)的缓解液(会争夺发生反应)。含有剂:可含有EDTA(1-5 mM)螯合金属件阳离子,可以减少硫化副想法。标记图片发生反应:摩尔比:一般是Sulfo-CY3-MAL与总体目标分子式的摩尔比值1:1-5:1(量过大纺织颜料可提升标记图片有效率,但需以后纯化清除未反应迟钝纺织颜料)。的反应管理体系:将Sulfo-CY3-MAL析出于DMSO或DMF(终浓度值≤10% v/v),放缓放入含受众团伙的缓解液中,轻柔的混匀后空调温度孵育。发应停止:入驻超量巯基有机化合物(如β-巯基工业乙醇至10 mM)淬灭未发应的马来酰亚胺基团,避开以后副发应。纯化与查证:纯化手段:透析:使用来大团伙(如蛋清质)的纯化,的还原未作用纺织染料和小团伙杂物。抑菌凝胶净化:食用Superdex 75或200柱分离出来符号有机物与未表现活性染料。HPLC:反相HPLC(如C18柱)可高效益脱离标志多肽或小分子结构。查验策略:荧光查重:能够 荧光分光光度计或凝胶的作用影像程序证实图标乙酰乙酸的荧光火箭发射。SDS-PAGE:标杆记蛋清质做电泳讲解,观察植物荧光条带与蛋清条带会不不一样。质谱:依据MALDI-TOF或ESI-MS判定标上结果的团伙量变化。温磬温馨提示模板:仅应使用科研开发,可以应使用人体肌肉實驗!wyh



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