Cy5-Hemoglobin,花菁素染料CY5标记血红蛋白的标记原理与制备
产品名称:Cy5-Hemoglobin,花菁素染料CY5标记血红蛋白的标记原理与制备
一、Cy5与血红蛋白的核心特性
1. Cy5颜料:远红荧光测试探针光谱分析基本特征:Cy5是花菁有机染料家族性的,激起光波可见光波长约650nm(红光),射出光波可见光波长约670nm(远粉红色荧光),占据生物学组建的光学反应菜单栏(650-900nm),可减低光散射和降解,适潜层组建三维成像。APP优越:荧鲜亮度较高、光稳定可靠性依赖于民俗有机染料(如TRITC),且远黄色荧光背静干挠低,適合多色标志(如与GFP、Cy3三人组合)。2. 血红色球血清(Hemoglobin):氧运载本质球血清结构类型与技能:猩红血清酶是红受损细胞中的四聚体血清酶(α₂β₂),没个亚基含个猩红素基团(含Fe²⁺),借助与空气融入(氧合)和施放(脱氧)保证氧搬家。生物学因素:氧运用力:受pH、CO₂溶度和2,3-BPG(二磷酸甘油酸)调节器,是调查氧分解代谢的关健氧分子。抗原性:人血红色淀粉酶具备有种属活性聊天,需用于穿插配血或血液症状研究探讨。
二、Cy5-Hemoglobin的标记原理与制备
1. 图标的工作原理反應基团:Cy5的吸附性结构(如Cy5-NHS酯)与猩红球蛋白的氨基(赖氨酸的ε-氨基)产生 共价偶联,转变成保持稳定的酰胺键。生理症状水平:普通在pH 7.5-8.5的缓存数据液(如PBS)中开展,恒温或4℃遮光生理症状2-4每小时,经由透析或凝露脱水出掉未根据的Cy5。2. 准备首要点记号比重设定:Cy5与猩红蛋清的摩尔比需系统优化(平常1-5:1),过高将会出现猩红蛋清亚基集结或猩红素环境改进,应响氧通过业务能力;过低则荧光表现匮乏。催化活性确认:图标后需测试猩红核核蛋白的氧融入的功能能不恢复,可用 氧解离曲线方程调查(测得P50值,即猩红核核蛋白50%呈现饱和状态时的氧分压)或 光谱图法(看猩红素释放峰变化无常)确认。纯化步凑:根据透析(挪作他用原子量12-14kDa)或凝露过滤程序(如Superdex 200)除去矿酸Cy5,防止出现视频背景荧光影响。温情显示:仅于科研工作,没有于人们科学试验!wyh


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