CY5标记的SE三乙胺盐，CY5-SE triethylamine salt的纯化与表征
CY5标签的SE三乙胺盐，CY5-SE triethylamine salt的纯化与表现
Cy5-SE三乙胺盐是以花菁染料Cy5为母核、在侧链羧基处引入琥珀酰亚胺活化酯（SE）的胺选择性标记试剂，阴离子染料部分与三乙胺形成有机胺盐，提高固体形态下的流动性与在无水性溶剂中的溶解性。该分子保留Cy5的长波吸收与近红区发射特征，适配常见激发线（633–647 nm），发射位于660–670 nm。SE基团对伯、仲胺具有较高反应选择性，在pH 8.0–8.8缓冲条件下与胺发生亲核取代生成稳定的酰胺键；水相中会随时间水解为非活化的羧酸，因此建议以无水DMSO或DMF制备浓缩母液，临用前滴加至目标体系。该试剂常用于蛋白质、肽、多糖-胺化衍生物、纳米材料表面的胺位点标记；为减少非特异反应，应避免含游离胺的缓冲组分（如Tris、甘氨酸），常用碳酸氢盐、硼酸盐或PBS（配以少量有机相）作为反应介质。典型摩尔投料比为染料：胺位点=3–10:1，室温或低温避光反应0.5–2 h。固体需干燥、避光、低温保存（-20 °C，干燥剂），溶液状态建议一次性分装，减少冻融；三乙胺盐作对离子不影响成键，但在水相纯化时可被交换或去除。
纯化与研究方法生理反应后纯化：核蛋白/大氧大分子偶联物：首选采取凝胶的作用油烟净化器或脱盐柱（如G-25/G-50或10 kDa超滤膜）除掉游走活性染料与小氧大分子副终产物；也可以用长宽高排阻层析推动抗震更改。如果需要更高一些饱和度，会令用阴离子相互交换或弱疏水色谱做进这一步抛光剂。小碳原子偶联物：推见反相制得HPLC（C18，水/乙腈系数，发挥性酸作铁铝离子对，如0.1%甲酸）；矿酸Cy5与的目标物品留存周期具有明星文化差异，用于分离处理。这个必要时做好对铁铝离子传递以得以想要盐型。固态染剂原材料的纯化与干涩：自动合成后采用反相或正相柱层析快速清理未不起作用当中体与NHS副有机物，调节情绪除萃取剂后在真空度下于高温干涩，存入阴凉收纳空间。指标含量常以HPLC（650 nm监测系统）达≥95%为合格率细则。组成部分与特征定量分析：• UV-Vis：在甲醇或PBS中测试汲取光谱图，Cy5主汲取峰约646–650 nm，肩峰与短波带使用在判别纯净度与集结的行为。• 荧光：发射卫星峰约662–670 nm，量子产出率受稀释剂与场景影向；蛋清偶联后乐观察到肺部结节影位移或效果变动，用以估评微场景相互作用。• 质谱：食材颜料体现 含SE的大团伙阳离子峰；偶联物质添加的性能相等“Cy5颜料骨架去NHS后的性能”与底物胺构成酰胺后的增量配电网。对大大团伙需用LC-MS（脱盐）或高辨别MS表现小大团伙偶联物。• HPLC/UPLC：多光波长的检测（260/280/650 nm），目标值峰单一化且开展时间段相对稳定；峰使用面积归一化用以来计算纯净度与游离态颜料农药残留。• IR：SE羰基带与酰胺I/II带用来界定活性酯与成键后副产物；活性酯油脂水解将突然出现羧酸优点消除。• NMR（采用到小分子式）：在DMSO-d6或CD3OD中仔细观察花菁骨架与丁二酰亚胺特色信息；偶联后NHS相关联信息消掉。• 淀粉酶偶联DOL（标上度）：按DOL = (A650/εCy5)/(A280/ε淀粉酶 − CF×A650/ε淀粉酶)算出，CF为Cy5对A280的调节指数（经历值约0.05–0.08，按厂家直销商数值调整 ）。• 风险管理体系保持稳定可靠性：数据监测pH 8.3下SE淀粉水解推动结构力学，优化系统添加了奇奇怪怪按顺序与不起作用天数；经过立刻间的HPLC与消化变幻开展保持稳定可靠性。产品名称：CY5标识的SE三乙胺盐
饱和度：95%+遗传性状：固态或液滴存放要求：-20°C粗糙阴凉另存礼品盒技术参数：50mg 100mg 250mg 500mg（按需提高）加工厂：pg电子娱乐游戏app 生态学
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