CY5标记的阿魏酸,Cy5-Ferulic-Acid的结构合成
CY5标注的阿魏酸,Cy5-Ferulic-Acid的构造制成
Cy5-Ferulic Acid 是通过将天然酚酸类分子阿魏酸(4-羟基-3-甲氧基-肉桂酸)与花菁染料Cy5偶联得到的荧光衍生物。阿魏酸分子含有芳环羟基、甲氧基以及带羧基的不饱和侧链,可提供多个潜在的修饰点。其中,羧基作为活性位点常用于与Cy5-NHS酯发生酰胺化反应,从而生成稳定的酰胺键。结合后产物兼具阿魏酸的特征与Cy5的近红外荧光性能,吸收峰约646–650 nm,发射在662–670 nm。此类衍生物常用于天然产物标记、药物传递系统示踪、剂分子分布研究及纳米材料表面功能化。
型式聚合底物纯化:阿魏酸原子末中端羧基对于基本体现点。镶嵌时,第一方面将阿魏酸不能溶解无水DMF或DMSO中,在惰性团队氛围下融入N,N'-二环己基碳二亚胺(DCC)或1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亚胺(EDC),并配合NHS形成了活力酯中部体Ferulic-NHS ester。此步必须0–4 °C下开展,不要羧基副影响或香气位点防氧化。联系臂形成(自选):如需增加溶于性或有效的减小对阿魏酸基座构成的串扰,可先与带伯胺的短链PEG(如H2N-PEG2-OH)现象,能够 Ferulic-PEG-NH2 诞生物。该在期间体最末端带伯胺,有助于后期与Cy5-NHS进行酰胺化。与Cy5偶联:在无水DMSO中,Ferulic-PEG-NH2(或立即安全使用阿魏酸-NHS碱化物)与Cy5-NHS酯发生反应,填加轻微生产碱(DIPEA或TEA),恒温遮光搅拌装置2–4 h,达成Cy5-Ferulic Acid 偶联物。若运用选择量化学上方向,则可在阿魏酸羧基地方组网叠氮或炔基PEG臂,再与Cy5-DBCO或Cy5-N3实行SPAAC/CuAAC不良反应,生产Cy5-阿魏酸选择量ip产业物。纯化:通过光催化原理型HPLC(C18柱,梯度方向过柱,水/乙腈+0.1%甲酸)区分副产物,采集而来制定目标荧光峰。冻干的纯化的Cy5-Ferulic Acid,含量≥95%。有必要时可确定透析清掉小分子结构硫氰酸盐。定性分析:UV-Vis/荧光光谱分析:验收Cy5症状释放和试射峰。质谱(HR-MS):检验团伙量增加相当于阿魏酸与Cy5的通过。NMR:在DMSO-d6中洞察分析幽香区与PEG链卫星信号,酰胺键的-CO-NH-质子为主要表现。HPLC/UPLC:开展含量和矿酸纺织染料农药残留。企业产商品名字称:CY5标记图片的阿魏酸,Cy5-Ferulic-Acid溶解度:95%+遗传性状:粉末状或固态储放要求:-20°C晾干背光保存图片木箱外形尺寸:50mg 100mg 250mg 500mg(按需打造)服务商:pg电子娱乐游戏app 生物技术