DPPE-PEG-Ce6,二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-Ce6的合成方法
服务英文名称:DPPE-PEG-Ce6,二棕榈酰基磷脂酰酒精胺-聚乙二醇-Ce6的制作而成措施
合成方法
1 要素现象方法流程
步聚1:DPPE-PEG的提炼作用类:DPPE的酒精胺方面与PEG的羧基或氨基经由酰胺键或酯键相连接。例子1:DPPE-NH₂ + PEG-COOH → DPPE-PEG-COOH(EDC/NHS滋养羧基,转换酰胺键)。实例2:DPPE-COOH + PEG-NH₂ → DPPE-PEG-NH₂(酰胺键),下一步能够羧基化突显引用生理反应位点。生活条件:石油醚:无水有机会石油醚(如DMF、DMSO或氯仿),制止磷脂溶解。的温度:40-60℃,作用时间间隔12-24小時。促使剂:EDC(滋养羧基)和NHS(安全稳定里边体),增强症状热效率。步凑2:BCN的偶联的反应类行:BCN的羧基或氨基与DPPE-PEG的尾端基团(如氨基或羧基)利用化学上的键连到。举例1:DPPE-PEG-NH₂ + BCN-COOH → DPPE-PEG-BCN(EDC/NHS滋养BCN的羧基,提取酰胺键)。实例2:DPPE-PEG-COOH + BCN-NH₂ → DPPE-PEG-BCN(酰胺键)。先决条件:pH:7.0-7.5(规避羧栽培基质子化或氨基去质子化)。的温度:高温或37℃,不起作用日期2-4个钟头。摩尔比:DPPE-PEG:BCN = 1:1.2(优化提升反映速率)。2 纯化与表现
纯化最简单的方法:透析:虚报冒领氧分子量按照PEG链长选(如10k Da),去掉未影响免疫试剂和副生成物。凝露过滤器色谱:Sephadex G-25或Superdex 200,破乳阶段目标乙酰乙酸与小大分子溶物。HPLC:反相C18柱,甲醇/水(含0.1% TFA)为分子运动相,纯化产品并旋光度的测定溶解度(>95%)。研究最简单的方法最简单的方法:组成部分确定:¹H NMR:DPPE的亚甲基本材料子(δ≈1.2-1.5 ppm)、PEG的反复重复单园(δ≈3.5-3.8 ppm)和BCN的环丙烷质子(δ≈0.5-1.0 ppm)及环辛炔质子(δ≈2.0-3.0 ppm)。MALDI-TOF:判断原子量,查证DPPE、PEG和BCN的对接。模块查证:点击量普通机械想法学习速度:与叠氮化物(如DBCO-PEG-FITC)想法后,可以通过荧光光谱图或HPLC验测结果制成量(想法学习速度一般>90%)。动态的光散射(DLS):法测納米科粒粒度分布(如脂质体体现后粒度分布约100-200 nm)。Zeta电位差:估评面正电荷(羧基去质子化后带负电,约-20 to -30 mV)。和谐温馨表示:仅用到科学,没能用到人们实验操作!wyh