AF488 TCO,Alexa Fluor TCO的化学特性
AF488 TCO 是 Alexa Fluor 488 系列的一个特化衍生物,连接了 Trans-Cyclooctene (TCO) 活性基团。TCO 属于一种高反应速率的“点击化学”基团,可与含有 tetrazine 的分子发生快速且高度特异的生物正交反应(Inverse Electron-Demand Diels–Alder, IEDDA)。AF488 TCO 结合了 Alexa Fluor 488 的优异荧光性能与 TCO 的高反应性,使其成为现代生物正交标记的理想选择,尤其适合细胞和体内标记。
化学特性
AF488 TCO 具有典型的 Alexa Fluor 488 荧光特性:激发波长约 495 nm,发射波长约 519 nm。其结构上通过稳定的共价键将 TCO 链接至荧光团。TCO 具备高度应变能,使其与 tetrazine 的反应非常迅速(反应速率可达 10^3–10^6 M^-1·s^-1),在生物条件下无需催化剂即可完成标记。
标记原理
AF488 TCO 的标记依赖于与 tetrazine 的 IEDDA 反应: