Phalloidin-CY5.5 定制合成技术

中文名称：鬼笔环肽-CY5.5
英文名称：Phalloidin-CY5.5

 

一、分子设计原理

Phalloidin（鬼笔环肽）是一个种从毒鹅膏菌（Amanita phalloides）中离出的七肽黑色素，其核心内容优点是还可以高亲合力、不能够逆地紧密联系F-肌动核蛋白酶（F-actin），而在神经细胞系生物制品学中被丰富应用于肌动核蛋白酶神经细胞系骨架的高特男人检测器。关键在于实施荧光成相功能表，Phalloidin常与荧光有机染料实施共价表达，型成不一样频谱的荧光检测器。CY5.5有的是种近红外荧光颜料，使用主波长约为694 nm，应该尽量不要神经血细胞和阻止机构的自愿荧光不干扰，有着阻止机构渗透力力强、环境低频噪音低的优越性。将CY5.5与Phalloidin偶联，应该在活体或规定神经血细胞中对F-肌动核蛋白网络数据通过深层次显像，并在多个荧光测试中与其余因而光中波段的荧光检测器辨别一下。由于，Phalloidin-CY5.5的方案设计原理就是：应用鬼笔环肽的高会暂时性紧密联系力量和CY5.5的近红外显像功能，创造出一个一类高敏锐度、高可穿透性的生殖细胞骨架荧光探头。 

二、定制合成技术路线

Phalloidin的亲水性基团遮盖Phalloidin分子式中天然的氨基或羟基基团可以作为为呈现位点。可以通过构建氨基或羧基可溶性基团，为前因后果与CY5.5的偶联提高生理反应位点。荧光有机染料CY5.5的碱化常见CY5.5-NHS ester（虎珀酰亚胺酯）对于碱化模式。该碱化酯可以与Phalloidin上的氨基引发有效酰胺键偶联，狠抓荧光基团相对稳定连接方式。偶联反馈在减慢液體系（pH 7.5–8.5）中，Phalloidin与CY5.5-NHS ester做共价反应迟钝。体现具体条件需管控温差（一般而言为环境温度），以保持成分保持稳判定。纯化具体步骤主要包括提高效率色谱仪色谱（HPLC）分离出来方向货物与未的反应的分散染色剂。凭借质谱与核磁振动解析确保代谢物节构。冻干与手机截图将纯化后的Phalloidin-CY5.5实行冻干，获得了相对稳定粉状行驶。保留水平一般而言为-20℃闭光，以始终维持荧光亲水性。 

三、关键工艺要点

位点决定：Phalloidin的表达位点需求防止出现会影响其与F-肌动蛋白质的根据催化活性。偶联效应：CY5.5的抗逆性酯在水氢氧化钠溶液中最易电离，以至于必须要最快反馈并优化网络摩尔比。饱和度掌控：保证未依照的游离态CY5.5完完全全删去，预防成相背景图片要素。安全稳判定核实：用光安全稳判定与整合工作测试方法其在神经细胞固定住及显像中的安全稳判定。 

四、技术优势与性能

高特女性朋友：Phalloidin团伙抓实对F-肌动血清的不易逆依照，荧光数据信息非常汇集。近红外三维成像好处：CY5.5的长光的波长释放出提高组织性组织荧光，信噪变高。深度阻止阻隔：适用性于活体绿色显像及厚切成片阻止的深度检测。私人订制化灵活机动性：可随着客户的需求改变接入位点、荧光密度或突显的方式，达到多中波段标记符号。进行实验性能强：可与许多种稳定和透化的办法兼容，适用免役荧光印染及共整合体视显微镜激光散斑。 生产地：宝鸡pg电子娱乐游戏app 微生物贷款用途：成果转化上述材料由上海pg电子娱乐游戏app 生物制品我zhn带来了，仅用做研究  

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