Phalloidin-CY3.5（鬼笔环肽-CY3.5 荧光探针）定制合成技术

一、分子设计原理

鬼笔环肽（Phalloidin）就是种从毒伞属口蘑中分刘海离着到的七肽环肽，才能 高速特女性朋友整合 F-Actin（氯纶状肌动球蛋白），而不与的 G-Actin 整合。其有趣的整合性能特点表明鬼笔环肽当上 细胞系骨架显像、微丝动态信息研究探讨 的非常完美分子结构测试探针。CY3.5（近红外橙红荧光染剂 3.5，Cyanine 3.5）不是种 培养光谱仪约 581 nm、导弹光谱仪约 596–610 nm 的荧光团，色度高、光不稳性好，互相参与荧光干拢较低。与传统的 CY3 相对来说，CY3.5 光谱仪向红移，更是和深度安排激光散斑。所以说，Phalloidin-CY3.5（鬼笔环肽-CY3.5 荧光检测器）的装修设计计划是：永久保存鬼笔环肽对 F-Actin 的高吸引力；完成化学物质偶联，将 CY3.5 安稳接入在鬼笔环肽的亲水性位点上；提高认识荧光团的光电耐热性免受偶联现象直接影响；具备 高水溶解性与生物技术相融性，可应用领域于调整组织体细胞及个部分活组织体细胞测试。 

二、定制合成技术路线

Phalloidin-CY3.5 的组成首要还有下例方法流程：原科筹备 鬼笔环肽（Phalloidin，≥95% 饱和度）；CY3.5 荧光团活性酶酯（CY3.5-NHS ester）或 CY3.5 马来酰亚胺（CY3.5-Maleimide）；兼容的可挥发容剂（DMSO、DMF）与保护液（PBS、碳酸盐保护液）。

活化反应
选择鬼笔环肽分子上 氨基（-NH2）或巯基（-SH） 作为偶联位点。CY3.5 的 NHS 酯与氨基发生酰胺化反应，或 CY3.5-Maleimide 与巯基进行 Michael 加成反应。

偶联响应状态调整反映平均温度：4–25 ℃（尽量避免荧光团溶解）；pH 范围图：7.4–8.5（保障胺基活性氧，并且保护性肽链设计）；摩尔比：Phalloidin : CY3.5 ≈ 1 : 1.2（适当的超量颜料确认已经反应迟钝）。纯化与测试效率液质色谱（HPLC）纯化达到集中化偶联生成物；MALDI-TOF 质谱验收原子量；分光光度计-因而光谱仪分析和荧光光谱仪分析确保光电机械性能；F-Actin 结合在一起实验报告核实菌物渗透性。 

三、关键工艺要点

的控制生理反应位点确定性：以免多方偶联损害鬼笔环肽与 F-Actin 的通过功能；保养荧光团相对经济性分析：症状需遮光开始，饱和溶液中以免 咖啡因中毒吸附性氧；降低液选用：安全使用无伯胺降低保障体系（如碳酸盐降低液），应对与 NHS 酯副表现；纯化工品艺：优享反相 HPLC，获得主峰酚类化合物，衡量唯一标识；冻干与存为：化学合成后需冻干成粉，存储在 -20 ℃ 遮光條件下。 

四、技术优势与性能

高特情人：完完全全继承 Phalloidin 与 F-Actin 的根据活性氧；优秀光学反应耐热性：CY3.5 试射最靠近 596–610 nm，网络信号屏幕亮度高，背景图案要素低；适当几斤激光散斑：可与 FITC（绿光）、CY5（远红光）等荧光探头整合选用；生物工程相溶解性好：水溶解性强，满足固定住肿瘤细胞膜上色及这部分活肿瘤细胞膜透化调查；光安全稳定性强：长日期脉冲激光复印难于漂白剂，最合适共准确把握与超签别电子显微镜。 

五、应用场景

神经元骨架激光散斑：用在特定神经元中 F-Actin 微丝形式的荧光标签；活组织实验英文：在重度透化具体条件下，改变对动向微丝网的评估；众多荧光影像：与 DAPI（上皮血细胞质）、MitoTracker（线粒体）、CY5-Phalloidin（鬼笔环肽-CY5 电极）合力的使用，完成亚上皮血细胞水准的多色影像；超判断体视显微镜（STED、SIM）：使用 CY3.5 的光不稳确定性和较长激发光谱长处，推动高判断率的 F-Actin 显像；进行显像：使用于厚进行切成片或透明度化进行中的肿瘤细胞骨架染料。 

六、推荐合成策略或典型产品方案

Phalloidin-CY3.5（鬼笔环肽-CY3.5 电极，固定位置细胞系用）：合适通常免疫力荧光实验英文；Phalloidin-CY3.5 高饱和度冻干粉：提拱 ≥95% HPLC 饱和度，最合适科学研究定量分析实验报告；多沉成相一体化设计：Phalloidin-CY3.5 + Phalloidin-CY5.5 + DAPI 组合式，广泛用于共集焦显微镜观察四色成相；活组织人体细胞兼容旧版本（低毒透化前提下食用）：在 PEG 保护好下改善组织人体细胞摄取量。 

产地：西安pg电子娱乐游戏app 生物

用途：科研

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