Cyanine5-PEG-Lysozyme，CY5-聚乙二醇-溶菌酶的发应水平操控

CY5-PEG-Lysozyme 是将荧光染料 Cy5 通过聚乙二醇（PEG）连接臂共价修饰于溶菌酶（Lysozyme）表面的产物，其反应步骤设计旨在保留溶菌酶活性、提高水溶性并实现荧光标记。

蛋白质预备• 溶菌酶容解于十分加载采集体系（如 PBS pH 7.4），清理游离于胺、巯基或抹除剂，切实保障偶联位点用于。• 促使用超滤膜或透析清理小分子结构杂质残渣。PEG 偶联反馈• Cy5-PEG-NHS 或 Cy5-PEG-maleimide 按添加摩尔当量入驻溶菌酶饱和溶液中。• 谈谈 NHS 酯系统：溶菌酶赖氨酸 ε-NH2 与 NHS 酯时有发生亲核抗衡，转变成安全稳定酰胺键。• 对 maleimide 风险管理体系：溶菌酶巯基与 maleimide 双键会出现 Michael 减伤，生成稳固硫醚键。反应迟钝具体条件掌控• 一个温和经济条件（4–25°C）生理反应 1–4 个小时，背光以免止 Cy5 光降解。• pH 7–8 可有保障 NHS 酯效率高不起作用，的同时保障血清构象。发生反应撤消与钙镁离子洗去• 参与甘氨酸或酒精胺全封闭剩于活力官能团。• 运行透析、反渗透膜或凝胶的作用过滤器洗去未体现 PEG、Cy5 及副终产物，换取清澈 CY5-PEG-Lysozyme。定性分析与校验• SDS-PAGE（荧光扫描拍摄）确定偶联非常成功及原子核量变化。• UV-Vis 光谱图测试 Cy5 吸引峰，分析箭头度。• 活力测定方法（如微动物裂解实验性）认可溶菌酶崔化作用删去。影响特殊性• PEG 链打造区域空间隔离霜，削减 Cy5 对生物学校干拢。• 偶联为共价牢实键，发生反应控制，荧光端防患淀粉酶关键。• 可手动调节节 PEG 总长和偶联度，做到荧光信息与微生物活性酶类。

产品名称：Cyanine5-PEG-Lysozyme，CY5-聚乙二醇-溶菌酶

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