CY7.5-Amyloid β-Peptide，1-42，human，CY7.5-β-淀粉样多肽，1-42的合成路线
CY7.5-Amyloid β-Peptide，1-42，human，CY7.5-β-玉米淀粉样多肽，1-42的镶嵌线路
CY7.5-Aβ(1-42)是将人源β-淀粉样肽Aβ1-42（序列DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA）与近红外花菁染料Cy7.5共轭得到的荧光肽探针。Aβ1-42富疏水并易自聚，近C端包含IIGLMVGGVVIA的跨膜样段，溶解与构象对标记位点高度敏感。Cy7.5在约780–790 nm激发、800–820 nm发射，摩尔消光系数通常≥2×10^5 M⁻¹·cm⁻¹，能在复杂背景中提供低自发荧光干扰的远红外信号。常见单位点标记策略包括：①N端α-氨基与Cy7.5-NHS酯偶联；②在N端前引入柔性接头（β-Ala、AEEA或PEG_n）以降低染料对折叠/聚集的扰动；③在肽序列两端外加Lys(Mtt/ivDde)或Cys作为位点选择性标记手柄。纯化后产物以TFA盐或醋酸盐形式冻干保存，避光、-20 °C干燥条件下稳定。典型表征采用RP-HPLC（C18，梯度洗脱）、MALDI-TOF/ESI-MS确认分子量，UV-Vis/荧光测定染料谱图与标记度（DOL≈0.8–1.0），并以SDS-PAGE或HP-SEC评估聚集与纯度。
镶嵌路径：1）固相组成肽链（SPPS）： 所采用Fmoc政策于Rink amide或Wang环氧树脂上自东东助手至N端稳步延展；对咸性/强碱位点动用准则侧链维护的（Asp/OtBu，Glu/OtBu，Lys(Boc)，His(Trt)，Tyr(tBu)，Ser/Thr(tBu)等）。若年度计划位点特异标示，于N端前加β-Ala或AEEA接线头，或另外加Lys(Mtt/ivDde)或Cys(Trt)并补齐正交维护的。每步偶联用HBTU/HATU+DIEA或DIC/Oxyma体系建设，难偶联位点可双耦或廷长化学反应。2）光敏树脂裂解与初纯： 用TFA/水/三异丙基硅烷（95:2.5:2.5）裂解2–3 h，冷乙醚沉积粗肽，RP-HPLC总体纯化，达到去养护Aβ1-42或含正交养护的前体。3A）NHS酯胺化标注（N端）： 将肽易不能溶解无水DMSO/水/0.1 M碳酸氢盐缓解（pH 8.3）或HEPES（pH 8.2），低溶液浓度（≤50 µM）并融入0.01–0.05%去垢剂（如Tween-20）或者少量HFIP以可以抑制聚积；Cy7.5-NHS易不能溶解DMSO，按1.1–1.5当量滴入，环境温度背光响应0.5–2 h。终结后以RP-HPLC脱离单标注峰，收集整理并冻干。3B）Maleimide-巯基增益（位点特异）： 若获取N端或侧链Cys，先用TCEP柔和恢复原，pH 6.5–7.0先决条件下与Cy7.5-Maleimide 1.2当量的现象30–60 min，解决胺侧的现象；陆陆续续RP-HPLC纯化。3C）Lys选泽性标示（正交保护英文区措施）： 先在饱和溶液中除掉Lys(ivDde)（5%肼/DMF多少次短洗），之外保护英文区措施长期保持；最后实施Cy7.5-NHS偶联，到位后再全去保护英文区措施/纯化。4）研究方法与工序： 能够MS审核更准确产品，UV-Vis折算DOL并验证染色剂谱位移；选用PBS或HBS含0.01%去垢剂、1–5%甘油/白砂糖成制剂，以防冻融；短期背光-20 °C存贮。必要的时通过尺寸大小/聚在一起品价（DLS/SEC-HPLC），事关批间一样性。产品名称：CY7.5-Amyloid β-Peptide，1-42，human
饱和度：95%+特性：物质或夜体存储必备条件：-20°C太干闭光存放木箱规格尺寸：50mg 100mg 250mg 500mg（按需出具）批发厂家：pg电子娱乐游戏app 微生物
pg电子娱乐游戏app
微信公众号
官方微信