CY7.5-Glabridin，CY7.5标出光甘草定的合并策略

CY7.5-Glabridin是一种由黄酮类化合物光甘草定（Glabridin）与近红外荧光染料CY7.5偶联形成的荧光标记小分子复合物。光甘草定是一种从甘草中分离得到的异黄酮类衍生物，分子结构中含有多个酚羟基，具备良好的氢键供体与反应位点。CY7.5则属于长链桥连的七亚甲基菁染料，其光学特征包括近红外区吸收波长约为780–800 nm，发射波长约为810–830 nm，具有较强的荧光量子产率和优异的光稳定性。将CY7.5与光甘草定偶联能够赋予其荧光可视化特性，从而便于在生物体系中追踪其分布、结合及作用行为。

制作而成指导思想最主要关键在于于光甘草定原子上的羟基或遮盖氨基最为响应位点，与CY7.5活力酯（如CY7.5-NHS ester）或CY7.5-异硫氰酸酯来去缩合偶联。一般的重要抉择CY7.5-NHS ester最为记号微生物培养基，但是NHS酯在性情温和要求下可与氨基或酚羟基发生了酯化/酰胺化响应。若直接性凭借光甘草定的酚羟基，响应有效率较低，但是典型政策是先对光甘草定原子来去氨基化遮盖，即在原子骨架的一头借助接入有一个短链氨基-PEG随之出现物（如氨基-PEG2或氨基-PEG3）对其来去遮盖，能够 光甘草定-PEG-NH2里头体。也许不单单给出了更开朗的氨基最为偶联位点，还能不断提高终有机物的水可溶性和三维空间刚性，尽量不要荧光猝灭。提炼步凑大概划分成步骤：光甘草定纯化与氨基化表达：将光甘草定融化于无水二甲基甲酰胺（DMF）或二氯二氧化氮（DCM）中，在碱因素下（如三乙胺或DIPEA产生），与氨基-PEG-羧酸（H2N-PEG-COOH）或氨基-PEG-蜜腊酰亚胺活性酶酯发生反响，造成光甘草定-PEG-NH2里边体。该步普通能够酯键或醚键接入，发生反响温差达到在空调温度至40℃。发生反响做好后，分为柱层析纯化以除去未发生反响的PEG产生物。与CY7.5-NHS ester偶联：将赢得的光甘草定-PEG-NH2中央体易溶DMF，参加等摩尔量的CY7.5-NHS ester和酸碱度缓冲器剂（如DIPEA）。在闭光必要条件下拌和反馈4–12时间，氨基与NHS酯出现酰胺化反馈，赢得CY7.5-Glabridin粗结果。反馈使用后，相转移催化剂完成旋蒸除掉，结果运用半制作HPLC使用剥离 ，以绝对结果纯净度。纯化与定量分析：物品进行反相HPLC（C18柱）分离处理，并进行质谱（MALDI-TOF或ESI-MS）核实原子量。UV-Vis获取光谱图仪出现主要CY7.5的近红外获取峰，一并在分光光度计区恢复光甘草定的优点获取峰；荧光释放出光谱图仪查验其荧光性状。进那步进行1H-NMR、13C-NMR查验接入基团和氨基化位点。终能够 的CY7.5-Glabridin兼备光甘草定的设计特色与CY7.5的近红外荧光耐热性，需用为深入分析手段用在分子结构探头搭建、荧光示踪及及材料风险管理体系中的信息可视化应用领域。PEG链的加入减少了其在水相中的溶于性，尽量不要了疏水集结影响的荧光淬灭，也加快了偶联转化率和生成物安全稳界定。

产品名称：CY7.5-Glabridin，CY7.5符号光甘草定

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