Cy7.5-hydrazide,CY7.5标记肼的纯化过程
Cy7.5-hydrazide,CY7.5标识肼的纯化期间
CY7.5-hydrazide 是以近红外荧光染料 CY7.5 为核心,通过将染料分子上的活性酯或活泼氯代基与肼(–NH–NH2)反应而得到的一类功能化荧光探针。其分子结构既保留了 CY7.5 长共轭多甲烯链与吲哚阳离子结构所带来的强近红外吸收与发射特性(λ_ex ~ 780 nm,λ_em ~ 810 nm),又引入了高度亲核性的肼基团,使其能够作为衍生化中间体用于与羰基化合物的缩合反应。肼基结构具有强反应活性,能够与醛基或酮基形成稳定的腙类化合物,从而使 CY7.5-hydrazide 在生物分子修饰中具有应用价值。
结构设计镶嵌问题,CY7.5 吸附性染料常以 NHS ester 或吸附性碳酸酯的结构当作开始和结束物,经过与大量肼水合物化学反响建立接触。基本在于,可在无水 DMF 或 DMSO 相转移催化剂中放入 CY7.5-NHS ester,自后很快假如合适的肼悬浊液,在地温下混合化学反响数个小时,使肼的氨基被淘汰 NHS 离去基团,取到 CY7.5-hydrazide。化学反响中需要严把握摩尔比,以不要多被淘汰或副化学反响的会出现。是因为 CY7.5 的多甲烯链对光空气氧化敏锐,镶嵌的过程 普遍在闭光、惰性气体防护下进行。该获得反應的基本原理应属于类型的亲核所代替反應:肼的最末端 –NH2 基团对 CY7.5-NHS ester 的羰基碳原子核确定亲核入侵,生成二维码四面八方体之间体,NHS 基团离去,终建成动态平衡的肼产生物。所述 CY7.5-hydrazide 可同时用在与醛基或酮基修饰语的碳水化合物、高蛋白质、缔合物出现缩合,最终得以变现近红外荧光标记符号。纯化阶段一般所采用 HPLC(反相 C18 柱,乙腈/水均值冲洗掉),提取主峰并冷藏空气干燥取到深绿色或深深紫色固态物体粉末状。化合物可能够 MALDI-TOF 质谱或 ESI-MS 完成团伙量要确认,并依照 UV-Vis 与荧光光谱图仪检验其近红外发送基本特征。核磁(^1H NMR)和红外光谱图仪(FTIR)可进每一步检验肼基团的存在着。CY7.5-hydrazide 的优劣势取决于其当做一两个“基本活力颜料”,才可以与一点中含醛/酮基的原子确立稳固紧密联系,于是在糖原类探头合并、醛基装饰配位混物接触面标志及小原子发展化上都有着主要用途。这一种成分合并营销策略为建设方案一系统荧光探头带来了了基本。产品名称:Cy7.5-hydrazide,CY7.5记号肼
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