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Cy7.5-0valbumin,CY7.5标记卵清蛋白的反应步骤
发布时间:2025-08-29     作者:axc   分享到:
Cy7.5-0valbumin,CY7.5标注卵清球蛋白的反應关键步骤

CY7.5-Ovalbumin 是将卵白蛋白(Ovalbumin, OVA)与近红外荧光染料 CY7.5 偶联形成的功能化蛋白。卵清蛋白是一种主要存在于鸡蛋清中的球状蛋白,分子量约 45 kDa,富含赖氨酸残基和 N-端氨基,为化学修饰提供了多个可反应位点。CY7.5 的近红外光学特性使其标记蛋白可用于活体成像、追踪实验及药物载体研究。

CY7.5-Ovalbumin 的典型示范化学反应方法步骤给出:卵清蛋白质的饱和溶液打算将卵清核蛋清溶水于生物学抗震液或碳酸氢盐抗震液(pH 8.0–8.5),以始终维持核蛋清质构象和活性酶类。核蛋清质盐浓度一般性操控在 1–10 mg/mL,尽可能以后光滑偶联。饱和溶液中可十分移除螯合剂(如 EDTA)防范金属质阴阳离子引响不起作用。CY7.5 灵活性化治理 CY7.5 常常以 NHS 酯或某个羧基滋养形态有。若为羧酸形态,需借助 EDC/NHS 化学反应迟钝滋养导出 CY7.5-NHS 酯上面体,以开展与核蛋白氨基的亲核反应迟钝能力素质。滋养全过程常常在烘干有机会萃取剂(如 DMSO)中做,并在恒温下保证 30–60 一分钟,以免活性染料可降解。偶联的反应实行将纯化的 CY7.5-NHS ester 速度慢引入血清质盐溶液中,以保证彻底的相溶以改变平滑相溶。偶联影响依懒于卵清血清质漆层赖氨酸侧链和 N-端氨基的亲核性防御羧基碳产生安稳的的酰胺键。影响基本在温度或 4°C 前提下持继 1–4 H,以维持血清质质空间结构安稳的并避免非特男人可降解。反應因素优化网络偶联想法的标示度可可以通过调整纺织染料与蛋清的摩尔比对其开始用心有效控制。摩尔比过高有机会产生蛋清质构象变或聚众,摩尔比过低则荧光移动信号达不到。想法 pH 和缓冲器盐氧化还原电位也是关健,常适用碳酸氢盐缓冲器液或 PBS 对其开始调节器,以有效确保酰胺化想法错误率和蛋清可靠稳定性处理性。货物纯化症状结束之后,需消除未症状的 CY7.5。最常见措施以及透析、凝露过滤程序(如 Sephadex G-25)、超滤膜或效率高效液相色谱(HPLC)脱离。纯化的时候长期保持冷藏以逃避血清质变形,一起抹去荧光数字信号抗弯强度。物品定性分析与存储纯化后的 CY7.5-Ovalbumin 可确认分光光度计-见到挥发光谱分析图、荧光光谱分析图或是 SDS-PAGE 等工艺核验标上胜利和标上度。其最典型的标上淀粉酶酶挥发峰在 780 nm 差不多,试射峰在 810 nm 差不多。标上淀粉酶酶应阴凉、低溫儲存(–20°C 晾干或响应液冻存),以保持良好荧光功效和淀粉酶酶质稳确定高性。以上,CY7.5-Ovalbumin 的体验布骤体验了蛋清稀硫酸提供、CY7.5 化学活化化、亲核偶联、体验生态改善、产品纯化与学习方法及贮藏等最为关键的原则。使用精深把控好颜料与蛋清的基数和体验生态,可荣获荧光的强度稳定性、设备构造系统的标注蛋清,可用做活体探测、组织细胞影像及微生物碳原子学习。

产品名称:Cy7.5-0valbumin,CY7.5标记符号卵清血清

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