CY7-LPS，CY7脂多糖的合成策略
CY7-LPS，CY7脂多糖的人工管理策略
CY7-LPS 是将近红外染料 Cyanine7 (CY7) 化学或生物正交偶联到脂多糖（LPS，lipopolysaccharide）分子上的荧光探针，目的是在细胞摄取、膜结合和体内分布研究中实现低背景、深穿透的成像。由于 LPS 为复杂的糖脂杂合体（脂 A、核心寡糖与 O-抗原），且含有游离羟基、二醇和若干羧基/磷酸基团，常用的标记策略需考虑保留其构象与促炎活性，同时避免引入会导致聚集或去活化的强有机条件。
镶嵌策略注意有几大类：十是碳基羧酸碱化法（EDC/NHS）——确定 LPS 目标或 O-抗原上的羧基（假如 Kdo 的网络终端羧基）与氨基化的连接头（如 adipic acid dihydrazide, ADH）建成紧密连接位点，那么用 CY7-NHS 与连接的胺体现自动生成可靠酰胺键。方法在弱酸性到碱式盐水相（pH 5.5–7.4，MES 或 PBS）确定，EDC 容量一般说来为羧基当量的2–5倍，NHS 或 Sulfo-NHS 增多前面体可靠性，气温 0–4 ℃ 至制冷体现 2–12 h，过程闭光并轻快搅拌装置以提高 LPS 聚在一起。第二糖链腐蚀的后肟/肼物理化学式——用亚硝酸钠钠响应的低溶度 NaIO4 温润腐蚀的糖环的二醇位转化醛基（管理時间与高温以预防过腐蚀的脂 A），己经与 aminooxy-CY7（或 hydrazide-CY7）在 pH 4.5–6.0 下做肟缩合或肼缩合，发应一般而言在在常温 1–4 h 到位，转化比较稳定的肟/肼键。此法位点选购高、要求温润。三是"超链接"物理化学式路由——先在 LPS 上接入短 PEG 链上的叠氮或炔基（经 ADH 或 EDC/NHS 相连接），继续使用 CY7-DBCO 或 CY7-alkyne 在水相做出 SPAAC 或 CuAAC（若用铜崔化需标准去掉铜阳离子并预防挤压伤 LPS）；SPAAC 免金屬、要求温润且合适生物制品仿品。纯化一般而言应用多类女子组合：先用透析（MWCO 3.5–10 kDa）或超滤膜（30 kDa cutoff 视 LPS 缩聚态而定）的还原破乳特异性染料与分不高子副结果；那么用妇科凝胶融合（Sephadex G-50/G-100）或化学合成型 SEC 破乳多种标志度的酚类化合物；一定要时用反相或亲水相色谱进第一步精制油。一直要保持低分割、环境温度并参加一些非阴离子表层特异性剂（如 0.01–0.05% Tween-20 或 0.05% CHAPS）与低浓值 NaCl 以稳定单不集中性。表现行为以及：UV紫外线-所以/荧光光谱分析（的记录 CY7 在 ~750 nm 的吸纳与 ~770–790 nm 的导弹发射，通过这个机会运算标注度 DOL）；FTIR 可助手观察动物新键演变成；MALDI-TOF/ESI-MS 对整个 LPS 管理体系常受到限制，但快速可应用于内在寡糖或脂 A 片断的判定；SDS-PAGE/Tricine-PAGE 联动近红外显像与银染可屏幕上显示标注后的均值分散；怪物学计量校准学办法（酚-浓盐酸法测糖纯度、磷纯度矫正）应用于矫正 DOL 并记算化学活化染料与 LPS 的摩尔比。效果性论文检测建议大家：特别标注上下 LAL 内毒物化学活化或体内 TLR4 中上游网络信号（随后 NF-κB 激活开通）以鉴定装饰对怪物学化学活化的会影响。补充与不稳性：散装、闭光、-20 ℃ 或 -80 ℃ 冷藏导出，杜绝致使反复冻融；在动物实验英文前用暂时性储放于 4 ℃ 解除冻结并轻快混匀。后，符号强度的用心调节是首要——过高 DOL 可变动亲水/疏水动态平衡影响水解或降低化学活化，提议起点摩尔比小（0.5–2 dye per LPS repeat）并日益优化提升。CY7-LPS 在主宰生殖细胞摄入定位跟踪、疾病局部影像与 LPS-双方的作用实验中极具必要app作用，但在解释动物学数据信息时应而且衡量符号对 LPS 原本特点的未知不干扰。产品名称：CY7-LPS，CY7脂多糖
溶解度：95%+特性：固态垃圾或介质贮藏能力：-20°C吹干背光保持包装袋型号：50mg 100mg 250mg 500mg（按需展示）商家：pg电子娱乐游戏app 微生物
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