CY7-EGCG，CY7标志儿茶素的准备的方法

CY7-EGCG是以表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）为亲水多酚骨架，外接近红外氰ine7染料（Cy7，λ_abs≈740–760 nm，λ_em≈770–800 nm）的共轭物。EGCG含多酚羟基与C3位没食子酸酯结构，赋予良好的抗氧化与多点氢键作用；Cy7提供强近红外吸收/发射、较高摩尔消光系数与深组织穿透能力。通过在EGCG上引入可控的单一“锚定位点”（优选经C3邻位羟基进行间接衍生化）并接入短链或中等长度PEG间隔臂（如PEG3–PEG8），可在维持水溶性与减少自猝灭之间取得平衡。典型产物在水、PBS及含少量有机助溶剂（DMSO<5%）中可形成分散良好的单体或小聚集体，紫外-可见光谱显示Cy7特征峰，荧光量子产率略低于游离Cy7而稳定性优于直接酚-染料偶联。建议标记度控制在1:1（EGCG:Cy7），以兼顾光谱纯度与结构均一性。主要表征手段包括^1H/^13C NMR、HR-ESI-MS或MALDI-TOF、RP-HPLC纯度与保留时间、UV-Vis/PL光谱、动态光散射（如需）。

制取手段（三步法，先产生胺手柄再与Cy7-NHS偶联）：方法步骤1（EGCG-PEG-NH2提纯）：在闭光、干躁状况下，将EGCG易溶无水DMF（或DMSO），假如丁二酸酸酐（1.2–1.5 eq）与催化剂的作用量DMAP/TEA，于温度搅匀2–4 h，选泽性达成EGCG-半琥铂酸酯（在酚羟基上引出–COOH）。反應液经释压除溶液后以水/乙酸乙酯浸出或随便RP-HPLC半提纯纯化，得EGCG-SA。随后不久用EDC·HCl/NHS（各1.1–1.3 eq）在pH 5.5–6.0的MES降低或DMF中滋养–COOH 20–40 min，假如H2N-PEG_n-NH2（n=3–6，1.0–1.2 eq），调pH至7.5–8.0，温度闭光反應2–6 h，能够 以单端胺暴露自己的EGCG-PEG-NH2。用脱盐柱或RP-HPLC纯化，冻干自备。部骤2（Cy7标记符号）：取Cy7-NHS酯（1.1 eq）混溶几瓶无水DMF，中滴加到含EGCG-PEG-NH2的0.1 M碳酸氢盐缓冲区/DMF混合式风险管理体系（v/v≈3/1，pH 8.3–8.6），总是有机相不高达30%。在惰性气体与阴凉条件下打料1–2 h（薄层或剖析HPLC监控NHS峰熄灭与化合物峰导出）。响应来完成后倒入几瓶甘氨酸淬灭残留NHS酯，直接稀释就可以以水相为重的纯净水相，通过C18 RP-HPLC（系数：水/0.1%TFA-乙腈/0.1%TFA）区分，收藏主峰并冻干，得CY7-EGCG（逾期得率30–60%，色度>95%）。研究方法与儲存：查证团伙量（HR-MS），登记λ_max与荧光释放出峰，计算方式记号度（A_750与A_280校核）。样机包装于粽色瓶，4 °C背光保持，远期专门配制成pH 7.4缓存液便用；经常性可-20 °C冻干保持并以免 重复多次冻融。

产品名称：CY7-EGCG，CY7标记图片儿茶素

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