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CY7-Troponinl,CY7标记肌钙蛋白I的制备方法
发布时间:2025-09-03     作者:axc   分享到:
CY7-Troponinl,CY7标记符号肌钙淀粉酶I的分离纯化的方式CY7标识肌钙球核核蛋白酶质I(Troponin I, TnI)是顺利根据事隔红外荧光纺织有机染料Cyanine7与TnI分子结构共价偶联生成的荧光组合物。TnI是肌钙球核核蛋白酶质组合物中的调整亚厂家,包括顺利根据限制肌动球核核蛋白酶质与肌球球核核蛋白酶质的完美反应管控肌肤缩紧。CY7-TnI的备制手段需同时纺织有机染料偶联错误率、球核核蛋白酶质构象可靠性及荧光活性氧,通畅通过清新的加载机制和可控制的化学物质修饰语对策。配制方式可分类些关键因素工作步骤:血清析出与缓存数据指标体系选购将纯化的TnI融掉在生理上缓存数据液中(如PBS,pH 7.2–7.4),狠抓核蛋白质形式完正、催化活性要保持。为了能够提供反响应用率,可不过要适应用氨基酸等缓存数据剂或NaCl缓解铝离子效果,同时避免出现应用高溶度展现剂,预防严重破坏核蛋白质构象。选取好的CY7产生物最常用的CY7符号采血管还包括CY7-NHS酯和CY7-马来酰亚胺酯。会因为TnI表面能含有赖氨酸残基,CY7-NHS酯可借助酰胺化体现与蛋白酶质氨基偶联;若蛋白酶质含有可外露的半胱氨酸残基,则CY7-马来酰亚胺酯能选择性偶联建成增强硫醚键。偶联反映环境在阴凉情况下,将CY7染色剂慢慢的加盟TnI液体中,保持良好不适合的摩尔比(一般来说CY7与TnI为3–10:1),在常温或4℃慢慢的绞拌4–12H。pH需保护在一般的中性或微是碱性的,以确认NHS酯或马来酰亚胺酯的催化活性,一起可以防止蛋白酶质构象提升。体现撤销与纯化影响停止后,操作透析(碳原子量挪作他用约3.5 kDa)或凝胶的作用滤过祛除未偶联的悬浮CY7碳原子。可能够UV-Vis和荧光光谱图监测器标签有效率,同時评价指标核蛋清格局的完整详细性。标签后的CY7-TnI可冻干店铺,或在低温环境储存液中存为,以达到荧光活性酶类和核蛋清职能。实用功能和应用软件核验分离纯化的CY7-TnI一般性需去技能检验,如保护对肌动球球蛋白-肌球球球蛋白挽回体的可以调节力,并完成荧光影像核定图标分布图制作光滑、移动信号效果增强。可以通过出现技巧换取的CY7-TnI兼顾荧光交互式模块和蛋清质活力性,可以用于组织细胞平行或身体之外标准体系中对肌钙蛋清质I原子的的动态搜寻和充分功能探索。

产品名称:CY7-Troponinl,CY7标记图片肌钙球蛋白I

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CY7-Troponinl

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