CY7-Protamine,CY7标记精蛋白的合成步骤概述
CY7-Protamine,CY7标记图片精球蛋白的组成步驟发展历程
CY7-Protamine是将近红外荧光染料Cyanine7与精蛋白(Protamine, PRT)分子共价偶联形成的标记蛋白。精蛋白是一类低分子量、高赖氨酸含量的碱性蛋白,用于核酸复合物形成、细胞转染和药物递送研究。CY7标记赋予其荧光可视化功能,有助于研究精蛋白的分布、递送效率和与核酸或细胞膜的相互作用。
合出方法发展历程:球蛋白溶水与减慢标准取舍将精球淀粉酶分解于中性粒细胞至微酸性响应液(如PBS pH 7.4),保证球淀粉酶分解情形,可以防止聚积。低盐浓度值可减掉静电放电手机屏蔽,增进标志效应,的同时保护英文球淀粉酶构象。CY7生化试剂抉择与预操作进行CY7-NHS酯或CY7-马来酰亚胺酯用作标签制剂。NHS酯用做与蛋白质赖氨酸残基偶联,马来酰亚胺酯用做与半胱氨酸残基造成硫醚键。染剂可先融化于大量DMSO或DMF中,以增加发应工作效率。偶联反响迟缓将CY7免疫试剂参与核球蛋白盐溶液,设定纺织染料与精核球蛋白摩尔比(基本为3–5:1),在环境温度背光标准下拌和2–6小时英文。pH维护在7–8时间,既提高纺织染料活力,又以防核蛋白构象改动。反应迟钝撤消想法做好后要加入甘氨酸或羟胺敞开式稳定度化学活化基团,以防之后的副想法。纯化用透析、妇科凝胶油烟净化器或离心式柱洗去未整合的活性染剂及副货物,得见纯化的CY7-Protamine。透析较常用分子结构量截流约3–5 kDa的膜,担保标签物洗去政治权利活性染剂而不影响蛋白酶。定量分析与品质调节UV-Vis和荧光光谱分析:验收箭头吸收率和荧光安全性能。SDS-PAGE:介绍淀粉酶的大小和色度。质谱:校验偶联大分子量变化。吸收与在使用纯化后的CY7-Protamine高低温闭光处理,以防经常冻融。能用于核酸结合物引入、生殖细胞摄食研发和中成药递送采集体系的web3d解析。用所诉步,CY7-Protamine颇具精核蛋白的实用功能与CY7近红外荧光性能特点,可在神经细胞激光散斑、核酸媒体学习及药递送实践中推动重要的能力。产品名称:CY7-Protamine,CY7标识精蛋白质
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