物料种类：Alexa Fluor594 箭头刀豆淀粉酶 A

英文名称：AF594 Concanavalin A

AF594 Concanavalin A（Alexa Fluor594 标出刀豆蛋清 A，代称 AF594-ConA）也是类将荧光纺织染料 Alexa Fluor594（AF594）与刀豆蛋清 A（Concanavalin A，ConA）使用海洋生态学学偶联构成的系统性海洋生态学测试探针，其管理处系统是再生利用 ConA 对某些糖原类的特女性朋友切合实力与 AF594 的荧光测试结果特点，改变对海洋生态学样板中 α-D - 甘霖糖、α-D - 提子糖下列关于衍海洋生态学的荧光位置与测试，宽泛app于細胞海洋生态学学、微海洋生态学学、方面的问题学等层面的糖基化深入介绍、細胞膜成分介绍及病原菌体鉴别等调查。

前提，刀豆蛋白酶酶 A（ConA）作很多种本身仿真植物凝集素，是该电极实行单糖靶向药物依照起来起来实际的核心理念插件。ConA 原于于刀豆（Canavalia ensiformis）种子网，其团伙架构为四聚体（团伙量约 102 kDa），不同亚基均含很多个特情人的单糖依照起来起来实际位点，能与 α-D - 珠露糖、α-D - 匍萄糖以及寡糖衍生品物（如珠露聚糖、葡聚糖）时有发生较高特情人的非共价依照起来起来实际，依照起来起来实际感染力强（解离常数 Kd 常在 10⁻⁶-10⁻⁷ mol/L 超范围），且不被另一个长见单糖（如 β- 半乳糖、绵白糖、蔗糖）的电磁波辐射。各种单糖依照起来起来实际特情人是 ConA 什么差别于另一个凝集素（如麦胚凝集素 WGA，特情人依照起来起来实际 N - 乙酰葡糖胺与唾沫酸）的的关键，使其成为了分析丰富 α- 珠露糖 / 匍萄糖糖链的菌物团伙（如糖蛋白酶酶、糖脂）的好平台。不但，ConA 的依照起来起来实际流程具备着可逆转性，可经过在体制中放入咖啡因中毒的 α- 甲基珠露糖苷（α-MM）角逐依照起来起来实际位点，实行依照起来起来实际与解离的自我调节，此种性能在的动态分析（如糖链的内化流程洞察分析）中具备着非常重要颜值。

而后，Alexa Fluor594（AF594）有所作为荧光汇报基团，为电极提供数据了优质的光学仪器特性。AF594 都属于红光光的可见光波长荧光有机染剂，其较大 提高了光的可见光波长约为 590 nm，较大 发送光的可见光波长约为 617 nm，该光的可见光波长的荧光在怪物影像中存在有明显强势：另一个说的是方向，红光的阻隔功能强大，也可以可以有效阻隔偏厚的怪物样例（如聚集切成片、3D 細胞核球），极大减少样例对光的消除与散射，不采用来表层结构聚集的影像定量剖析；另另一个说的是方向，怪物样例（如細胞核、聚集）产品的组织化荧光在红光光的可见光波长极弱，也可以较大 最大有效降低蓝本4g的信号干预，有明显提高了影像的信噪比，通常是和对低丰度糖链的探测。前者，AF594 存在相当高的荧光量子产出率（约 0.6）和优异的光平衡性，较之于傳統的红光有机染剂（如 Cy3、罗丹明类），其在长耗时机光光照下不宜发生了光漂白剂，也可以做到活細胞核动图影像、长耗时监视糖链布局变化规律的实验室操作所需，如在观测細胞核漆层糖链的内吞方式或沙门氏菌漆层糖基的动图表达方法时，可以保证数小时内内荧光4g的信号的平衡工作输出。一并，AF594 的荧光光谱图剖析与任何普遍荧光有机染剂（如绿光 AF488、蓝光 DAPI）的光谱图剖析偏移度低，不采用来多色荧光影像实验室操作，可一并标识糖元与任何怪物氧分子（如蛋白酶质、核酸），变现两组分的共产品定位定量剖析。

从物理偶联制作工艺而言，AF594 与 ConA 的偶联需照顾荧光能力与凝集素活性酶的永久保存。一样 而言用于 NHS 酯偶联法：AF594 采用物理绘制建立 NHS 酯基团（AF594-NHS），该基团可与 ConA 碳原子中赖氨酸残基的伯氨基（-NH₂）引发特异形生理的生理反应，行成不稳定性的酰胺键（-CONH-），体现荧光活性纺织染剂与凝集素的共价连入。偶联方式中需严格要求掌控生理的生理反应水平（如 pH 值 7.2-8.0、常温的、宜于的活性纺织染剂与 ConA 摩尔比），以提高认识一下两种：七是避开 ConA 的单糖融入位点因物理绘制而解离，一样 而言采用预检测系统优化摩尔比（一样 为 5:1 至 15:1），极大减少活性纺织染剂碳原子对融入位点的发展空间位阻或电子设备因素不良影响；第二是避开 ConA 过快符号图片会造成的缩聚或融化性变低，理性化的符号图片溶解度（一样 而言每隔 ConA 四聚体融入 4-8 个 AF594 碳原子）可在衡量荧光比强度的另外，恢复 ConA 的纯天然四聚体格局与水可溶。偶联完成任务后，需采用妇科凝胶筛选层析（如 Sephadex G-25 柱）消除未生理的生理反应的分离 AF594，提高认识探头的含量，避开分离活性纺织染剂的背景图荧光串扰检测然而。

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