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AF594 标记链霉亲和素偶联物,AF594 标记链霉亲和素偶联物
发布时间:2025-09-03     作者:HLL   分享到:
物料公司名称:AF594 符号链霉亲和素偶联物,AF594 符号链霉亲和素偶联物AF594 记号链霉亲和素偶联物是微动物医疗实验中运用大量的荧光监测器具,由链霉亲和素(Streptavidin)与 Alexa Fluor 594(AF594)荧光纺织染料凭借共价偶联制法而成。该混合物充分利用链霉亲和素与微动物素(Biotin)共同间极富的特女性朋友共同用(解离常数 Kd 约为 10⁻¹⁵ M,是己知天然界中最猛的非共价共同用之四),组合 AF594 优异的的红白色荧光耐磨性,可实现了对微动物素记号团伙式(如微动物素化抗原、微动物素化核酸、微动物素化电极)的靶向药物设别、追踪定位与化学发光法,在抗体监测、团伙式改良品种、癌细胞三维成像等范围具备不易代替品的用。


首要,链霉亲和素(Streptavidin)是该偶联物的 “靶向药物体系化”,其来源地与构成功能定了其高自己的人格魅力与非特异朋友。链霉亲和素会从链结核杆菌(Streptomyces avidinii)发孝结果中拆分纯化的四聚体核球蛋白酶,氧原子结构式安全性能约为 60 kDa,每项四聚体由 4 个是一样的的亚基组成的,每项亚基含两个生态学素配合实际位点,这样两个链霉亲和素氧原子结构式可同时配合实际 4 个生态学素氧原子结构式,这样的多价配合实际功能使其与生态学素符号氧原子结构式的配合实际兼备很好的不稳性与自己的人格魅力。与亲和素(Avidin,从蛋黄液中拆分)差距,链霉亲和素兼备相关系数资源优势:1是等电点低(pI 约为 5.0-6.0,亲和素 pI 约为 10.5),在人体生理 pH 條件下呈强含酸性,不要与带负电的生态学氧原子结构式(如核酸、受损血细胞核球蛋白酶)进行非非特异朋友除静电配合实际,下降试验时代背景的信号;二没有碳水氧化物装饰,尽量避免了亲和素因糖基化造成的非非特异朋友配合实际(如与受损血细胞外面的凝集素配合实际),进步增加监测非特异朋友;三是溶水性好,在多的缓冲区液條件下(如 PBS、Tris-HCl)均能坚持健康的溶水性,不要进行聚在一起,确保安全生产偶联影响的能力与监测器的不稳性。这样功能使链霉亲和素被选为生态学素 - 亲和素整体(Biotin-Avidin System,BAS)中最先用的配合实际核球蛋白酶,为 AF594 符号偶联物的高非特异朋友监测尊定基本。


而后,Alexa Fluor 594(AF594)是荧光标注基团,为偶联物展示 了表现出色的光学反应性能参数,充分考虑多海洋微生态学制品影像所需。AF594 一种朱鲜橘红色荧光纺织活性染色剂,应归罗丹明类衍海洋微生态学制品,其大程度引起光波光的波长约为 590 nm,大程度释放光波光的波长约为 617 nm,释放敞亮的朱鲜橘红色荧光,与荧光电子显微镜的罗丹明(Rhodamine)或 Texas Red 滤光片控制系统完整兼容,以及进行工作操作步骤的与手机网络无线信号收采。比较于传统文化型朱鲜橘红色荧光纺织活性染色剂(如 Cy3、罗丹明 6G),AF594 具备下例中心优势与劣势:一种是高荧光量子劳动生产率(约 0.65),在低盐浓度下只能发生强荧光手机网络无线信号,有效降低了偶联物运用量,缩减非特女性朋友根据与对海洋微生态学制品样版的隐藏的毒副功效(如对活受损肿瘤神经元系核的磨损),通常时候轻微样版探测或活受损肿瘤神经元系核影像;二较弱的抗光增白技能,确认有机化学构成突显(如导入钢度环构成、不断增强原子核维持的性),AF594 的光增白浓度较传统文化型纺织活性染色剂有效降低了约 50%,可耐热长时光的激光机器直接照射(如共聚焦点电子显微镜的连续式扫一扫,用时会达 1-2 个钟头),时候动态化观擦海洋微生态学制品原子核的运功或之间功效(如海洋微生态学制品素化蛋清激酶在受损肿瘤神经元系核膜上的变更);三是宽 pH 维持的范围图(pH 4.5-8.5),在受损肿瘤神经元系核内偏酸生态(如溶酶体,pH 4.5-5.5)或普通生态(如受损肿瘤神经元系核质,pH 7.2-7.4)中,荧光密度动荡不低于 15%,保障不相同受损肿瘤神经元系核行政区域或进行工作要求下荧光手机网络无线信号的确切性;四是低光谱分析图重复,AF594 的荧光光谱分析图与绿色健康(如 AF488)、海蓝(如 DAPI)荧光纺织活性染色剂的重复度越来越低,以及多色荧光共标注进行工作,可直接探测个海洋微生态学制品原子核(如直接探测海洋微生态学制品素化抗体阳性标注的蛋清 A、AF488 标注的蛋清 B、DAPI 标注的受损肿瘤神经元系核核),保证 多层次空间海洋微生态学制品学新信息的调用。


在药剂学偶联分离纯化过程中中,需选用平稳且高利用率的作用攻略 ,保障链霉亲和素的微海洋生物素综合海洋生物与 AF594 的荧光耐磨性未受毁损。平常,AF594 以海洋生物酯(如 NHS 酯,N - 羟基虎珀酰亚胺酯)的的方式陆续参与作用 ——AF594-NHS 酯的海洋生物基团可与链霉亲和素原子上的氨基(包括源于赖氨酸残基的 ε- 氨基,每隔链霉亲和素亚基含约 4 个赖氨酸残基)情况酰胺化作用,生成稳定性的共价键,将荧光颜料偶联到淀粉酶上。偶联作用要在严苛操作的能力下做:五是作用抗震器液选取,平常用 pH 7.2-7.5 的 PBS 抗震器液,应对用含氨基的抗震器液(如 Tris-HCl),必免抗震器液中的氨基与 NHS 酯竟争作用,缩减偶联利用率;二摩尔配比操作,AF594 与链霉亲和素的摩尔比平常为 4-6:1,上述配比可保障每隔链霉亲和素四聚体偶联 4-6 个 AF594 原子 —— 偶联个数过少会出现荧光信息力度普遍存在问题,引响检查敏感度;个数假如你则有机会会因颜料原子的环境位阻效用,遮蔽链霉亲和素的微海洋生物素综合位点,出现其综合海洋生物回落;三是作用气温与的时期,常温(20-25℃)孵育 1-2 时期,应对高温天气(>30℃)出现链霉亲和素转化或温度(<4℃)延长了作用的时期。偶联达成后,需借助凝胶的作用滤过层析(如 Sephadex G-25 或 Superdex 75 层析柱)消除未偶联的自由 AF594—— 自由颜料会所产生非特喜欢的人荧光信息,侵扰检查但是,之所以必要完全消除;互相,选用离心法超滤膜(截流原子量 30 kDa)进步纯化有机物,消除有机会会普遍存在的淀粉酶聚积物,保障偶联物的均一性。生产地:浙江规格型号:50mg 100mg 500mg含量:95%方式:液态/粉末状存储的条件:要在冷藏室保存和谐提醒:仅于教育科研,不可于女性身体科学试验!北京pg电子娱乐游戏app 动物现代创新科技非常有限司是家集研制,加工,卖为混合式的高现代创新科技工厂,可保证人工磷脂、好的成绩子聚乙二醇衍动物、嵌段共聚物、顺磁/超顺永磁铁奈米颗料、奈米金及奈米金棒、近红外荧光几丁质酶颜料、几丁质酶荧光几丁质酶颜料、荧光标示的葡聚糖BSA和链霉亲和素、核蛋白热塑剂、小原子结构PEG衍动物、弹框药剂学产品的、树木状聚合反应物、环糊精衍动物、大环配体类、荧光量子点、透明图片质酸衍动物、納米材料或脱色納米材料、碳奈米管、富勒烯……,也可以供给各不相同用户的设计供给。

AF594 链霉亲和素偶联物

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