CY7-Fetoprotein，CY7甲胎蛋白的反应条件控制方法
CY7-Fetoprotein，CY7甲胎核蛋白的现象先决条件操作的方法
CY7-甲胎蛋白（CY7-Fetoprotein, CY7-AFP）是通过将近红外荧光染料Cyanine7（CY7）与甲胎蛋白（Alpha-fetoprotein, AFP）偶联得到的一类荧光标记蛋白复合物。AFP是一种分子量约70 kDa 的糖蛋白，含有多个赖氨酸残基的ε-氨基和较少的半胱氨酸巯基，这些功能基团为其提供了与荧光染料衍生物反应的位点。CY7作为典型的近红外荧光染料，具有长波长激发与发射、高组织穿透力和低背景信号等优势，偶联后得到的CY7-AFP可用于体内外成像、蛋白定位研究以及高灵敏度检测实验。
在搭建CY7-AFP的环节中，重要步聚是将活性酶类化的CY7衍生产品物与AFP的氨基或巯基产生特异想法。最常用的有机染料模式为CY7-NHS酯或CY7-马来酰亚胺（CY7-Maleimide），各分为与赖氨酸氨基和半胱氨酸巯基想法。特定体现过程如下所述：蛋白酶缓解液安排AFP需分解在宜的加载标准中。若用到NHS酯标注，一般性的选择无胺的加载液，如0.1 M碳酸盐加载液（pH 8.3）；若用到马来酰亚胺标注，则适于pH 6.5–7.2 的聚磷酸盐加载液，以提高巯基活性氧。防范用到含Tris或甘氨酸的加载液，担心其氨基会与NHS酯争夺反馈。淀粉酶预进行处理在巯基箭头措施中，若AFP巯基出现二硫键的情况，需用先用柔和的回归剂（如TCEP）整理，外露轻松自由巯基，便与CY7-Maleimide形成响应。回归剂应在响应前剔除，以防与染剂竞争与合作。特异性有机染料溶剂备好CY7-NHS酯或CY7-Maleimide一般性以DMSO或DMF为稀释剂可溶性高，溶于水的，浓度值为1–10 mM。考虑到纺织染料团伙易光增白，全操作的应遮光实现。偶联想法将CY7具象化物舒适按摩尔比（一般性是5–20倍于AFP的摩尔量）加入到到球蛋白酶硫酸铜溶液中，在闭光前提下缓缓分层。NHS酯与球蛋白酶赖氨酸氨基的反應研究进展是：氨基的孤对微电子攻打NHS酯的羰基碳，行成四面八方体在期间体，发出NHS离去基团，终转成维持的酰胺键。马来酰亚胺与巯基的反應研究进展为Michael减伤，巯基是 亲核体普攻马来酰亚胺双键，转成维持的硫醚键。反响条件操控NHS酯发生反馈时候基本上为0.5–2 h，温度因素为常温；马来酰亚胺发生反馈通常情况在较多日候内达到（30–60 min）。在这里环节中需制止高平稳强光照射，以要保持蛋白质特异性和染色剂动态平衡性。纯化步驟不良生理反应到位后，混合式物中既所含标注生成物，也所含未不良生理反应的解离颜料。实用的纯化最简单的方法为凝露过滤系统层析（如Sephadex G-25）或反渗透装置离心式。纯化步骤中，切合了颜料的AFP因大分子量明显而与解离颜料隔离，因而到高色度的CY7-AFP。定性定性分析定性分析箭头乙酰乙酸需采用UV紫外线-屏蔽光谱仪图和荧光光谱仪图确定验测。CY7的吸纳峰约为750 nm，AFP的球核球蛋白吸纳峰在280 nm，双方的比率能用于确定箭头热效率。一样 对方箭头度为2–6个颜料分子式/球核球蛋白，以确保荧光警报的强度而不关系球核球蛋白功用。总的：CY7-甲胎球核淀粉酶的化学合成依耐于NHS酯或马来酰亚胺产甲烷纺织纺织染料与AFP上氨基或巯基的共价偶联，这个反映全过程还包括减慢液选取、球核淀粉酶预加工处理、纺织纺织染料溶解完、偶联反映、纯化与定性分析6个核心过程。可以通过等等过程实现的CY7-AFP这不仅长期保持了AFP的球核淀粉酶形态，时必备条件比较稳定的近红外荧光形态，为其在身体影像、氧分子示踪与高敏锐度的检测提供了了可信的机器。产品名称：CY7-Fetoprotein，CY7甲胎核蛋白
饱和度：95%+相对性状：胶体或介质液体存贮條件：-20°C变干背光保管产品包装型号规格：50mg 100mg 250mg 500mg（按需能提供）生产厂：pg电子娱乐游戏app 菌物
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