DMPE-CY7,CY7标记二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱的合成方法步骤
DMPE-CY7,CY7标出二肉豆蔻年华酰磷脂酰胆碱的炼制最简单的方法方法
DMPE–Cy7 是一种由二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺(DMPE, 1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine)与近红外荧光染料 Cy7 共价结合的两亲性探针。其分子结构由三个主要部分构成:① 两条 C14 饱和脂肪链,保证分子在脂质双层中的稳定嵌入;② 磷脂酰乙醇胺头基,提供反应位点(伯胺);③ 近红外荧光染料 Cy7,典型吸收峰约 745–750 nm,发射峰在 770–780 nm,具有较高的量子产率与优良的深部组织穿透性。通过将荧光基团与磷脂骨架结合,产物能够形成稳定的膜嵌入型荧光探针,在脂质体、脂质纳米颗粒或模型膜体系中实现实时示踪和荧光成像。
合出手段一般根据 Cy7 颜料的催化活性酯(如 Cy7–NHS ester)与 DMPE 的游离子氨基中间的缩合发生表现。DMPE 的乙酸乙酯胺头基含伯胺,就能够在弱碱必备条件下是 亲核体功击 Cy7–NHS 酯的羰基,产生维持的酰胺键。该酰胺联接不禁无机化学维持,但是在水相情况中很容易崩裂,维持了颜料与脂质的不变,避免后期使用时出现晃动影响体验效果组合。合出发生表现可细化为:DMPE–NH₂ + Cy7–NHS → DMPE–NH–CO–Cy7 + NHS(离去基团)构成定制角度,DMPE 给出了亲脂锚定基团和亲水头基,Cy7 则赋予了近红外发光字形态。二者中间融入后乙酰乙酸仍恢复 amphiphilic 材质,可以自組裝進入脂质多层或脂质体面。与其共价置于的颜料相较于,共价偶联的 DMPE–Cy7 更具更为重要的光维持性和抗淋洗性,在人体内环镜或长周期配置中仍能恢复数据维持。若在 DMPE 与 Cy7 中间获取 PEG spacer(如 PEG2–PEG12),则可进一大步调理颜料在膜从表面的可及性,极大减少众多淬灭,延长荧光质量。聚合工艺设计通常为以上工作步骤:① 生理反应需要准备:将 DMPE 过滤烘干后析出于无水氯仿/甲醇或 DMF/氯仿混合物萃取剂中。Cy7–NHS 混溶极少量无水 DMF 或 DMSO 中,临用前现配上可以防止油脂水解。② 偶联症状:在惰性氛围音乐保护英文下,按磨尔比 DMPE:Cy7–NHS = 1:1.2–1.5 标定,申请加入恰当有机物碱(如 DIPEA 或 TEA),室内温度掺和症状 6–16 小時,过程中需阴凉工作。伯胺与 NHS 酯缩合转成酰胺,时尽情释放 NHS 离去基团。③ 纯化:粗副产物经旋蒸抛开有机化学容剂后,可能够 反相制取型 HPLC 剥离 。外流相采取水/乙腈等度体系中,并含 0.1% TFA 或甲酸以促进峰形。DMPE–Cy7 的抹去日期很深晚于自由颜料或未发生反应的 DMPE。④ 定性分析:UV-Vis 光谱分析图可判断染剂吸收能力峰(~750 nm),荧光光谱分析图法测定散发峰(~770–780 nm)。ESI-MS 或 MALDI-TOF 可认证碳原子量(约在 DMPE 与 Cy7 碳原子量和的领域)。¹H NMR 和 ³¹P NMR 用来判断脂质骨架与无线连接完美性。HPLC 色度需高于 95%,以担保未果用成效。在组成部分设计性质上,DMPE–Cy7 的多条肉白芷酰链给出了疏水性树脂支撑体系,使其可融入脂质双重内;磷酸甘油骨架达到原子两亲性;头基与 Cy7 内的酰胺键确认共价平稳。该组成部分设计为了保证了其在整治膜、脂质体及肿瘤细胞质中的较好导入性,并因近红外对话窗口的优裕光学薄膜性质而被主要用于身体里荧光显像、脂质体分布图制作研究分析、治疗药物递送体统监控及膜球蛋白共市场定位實驗。笔者认为,DMPE–Cy7 的结构的合并源于 DMPE 胺基与 Cy7–NHS 的酰胺化影响,影响因素温顺、运营非常简单,且产品具有着不错的光学反应性能参数和膜锚定稳定量分析性。在膜菌物学与用药递送调查中,它为脂质体及脂质修饰语装置展示 了是真的吗的近红外荧光符号技术手段。产品名称:DMPE-CY7,CY7标注二肉豆蔻年华酰磷脂酰胆碱
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