FITC-DA，荧光素标上多巴胺的反馈条件

FITC-DA（荧光素标记多巴胺，Fluorescein-Dopamine）是由荧光素异硫氰酸酯（FITC, Fluorescein isothiocyanate）与多巴胺（dopamine, DA）分子偶联得到的荧光化学探针。FITC是一种常用的绿色荧光染料，激发波长约495 nm，发射波长约520 nm，具有较高的荧光量子产率和良好的光稳定性；多巴胺则是一种含有邻苯二酚结构和伯胺基团的小分子神经递质。两者结合后不仅保留了FITC的优异荧光性能，还利用了多巴胺分子上的活性伯胺作为偶联位点，使FITC-DA兼具荧光示踪与多巴胺化学功能特性，因而在材料修饰、传感器构建和生物化学研究中具有应用价值。

在催化空间结构的上，多巴胺分子构成是的邻苯二酚（catechol）环和是的伯胺（–NH2）侧链。FITC分子中有异硫氰酸酯（–N=C=S）基团，可与伯胺在平稳咸性情况下（通畅pH 8–9）发生了亲核减伤化学影响，产生可靠的硫脲键（–NH–C(=S)–NH–）。在该化学影响中，多巴胺的伯胺基团算作亲核实验试剂普攻FITC的碳分子，而异硫氰酸酯基团展示 化学影响亲水性中心点。化学影响产生的硫脲空间结构的可靠，不方便在水悬浊液停止裂，进而保证质量了物质的可靠性与可反复重复应用性。在不起作用的情形管理方面，FITC-DA的配制通常情况下在无水有机化学容剂（如DMSO、DMF）与加载采集体系（如碳酸氢盐加载液）中来。伴随FITC分子式对光特别敏感，不起作用必须闭光的情形下运作，预防止荧光基团光降解。不起作用的佳pH值在8.3–9.0左右，于此多巴胺伯胺仍处于区域去质子化的情形，亲核性加强，有效于与FITC的异硫氰酸酯有偶联。不起作用温湿度似的抑制在温度至37 ℃左右，以应对多巴胺的邻苯二酚形式被腐蚀成多巴胺醌。若在咸性室内环境中时太短，多巴胺的邻苯二酚易有自腐蚀，那么实验报告时常在氦气或氩气庇护下来，并加进剂（如抗坏血酸、谷胱甘肽）预防副不起作用有。在具体情况分解整个过程中，典型方法为：第一方面将多巴胺稀盐酸盐溶解度在碱性食物缓解稀硫酸中，调准至恰当pH以裸露伯胺几丁质酶；陆陆续续将FITC易不能溶解一些DMSO中，放缓中滴加至少巴胺稀硫酸中，在搅拌装置因素下响应数个钟头至過夜。响应完整后，生成物可顺利通过透析、妇科凝胶脱水层析或HPLC溶合纯化，以的还原未响应的FITC与多巴胺。终能够的FITC-DA生成物普通为黄翠墨绿色粉尘或稀硫酸，易不能溶解水和个部分有机酸容剂中，兼具激烈的翠墨绿色荧光。在研究方法上，所用的涉及紫外光-可看得出光谱图仪和荧光光谱图仪检则，以查证FITC的光学玻璃因素可不行补齐；质谱（ESI-MS或MALDI-TOF）主要主要用于核定碳原子量及偶联完美；核磁振动（NMR）行有助于研究分析硫脲键的造成；HPLC则主要主要用于检则化合物含量与悬浮FITC的除掉成效。以上研究方法总体核定了FITC-DA的结构的与含量。笔者认为，FITC-DA的炼制受制于于FITC异硫氰酸酯基团与多巴胺伯胺彼此的偶联发应，发应水平的重点而言维护和缓偏碱、杜绝多巴胺自钝化及FITC的光降解。终达到的FITC-DA兼有强荧光预警和多巴胺原子属性，用于为荧光电极技术应用于的原材料表层装饰、原子自动识别科学研究及感知器倡导中。

产品名称：FITC-DA，荧光素标识多巴胺

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