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FITC-DA,荧光素标记多巴胺的反应条件
发布时间:2025-09-09     作者:axc   分享到:
FITC-DA,荧光素图标多巴胺的反响先决条件

FITC-DA(荧光素标记多巴胺,Fluorescein-Dopamine)是由荧光素异硫氰酸酯(FITC, Fluorescein isothiocyanate)与多巴胺(dopamine, DA)分子偶联得到的荧光化学探针。FITC是一种常用的绿色荧光染料,激发波长约495 nm,发射波长约520 nm,具有较高的荧光量子产率和良好的光稳定性;多巴胺则是一种含有邻苯二酚结构和伯胺基团的小分子神经递质。两者结合后不仅保留了FITC的优异荧光性能,还利用了多巴胺分子上的活性伯胺作为偶联位点,使FITC-DA兼具荧光示踪与多巴胺化学功能特性,因而在材料修饰、传感器构建和生物化学研究中具有应用价值。

在化学上空间节构上,多巴胺氧分子节构包含了一两个邻苯二酚(catechol)环和一两个伯胺(–NH2)侧链。FITC氧分子节构可能含有异硫氰酸酯(–N=C=S)基团,可与伯胺在温暖偏碱性水平下(通畅pH 8–9)发生亲核加上发生表现,提取维持的硫脲键(–NH–C(=S)–NH–)。在该发生表现中,多巴胺的伯胺基团是 亲核化学药品网络攻击FITC的碳共价键,而异硫氰酸酯基团出示发生表现特异性服务中心。发生表现提取的硫脲空间节构维持,很不容易在水盐溶液出现异常裂,故而 保障了生成物的维持性与可相同选用性。在生理生理反映條件方向,FITC-DA的备制通常情况是在无水巧妙溶液(如DMSO、DMF)与减慢区安全体系(如碳酸氢盐减慢区液)中去。随着FITC氧分子对光刺激性,生理生理反映需要在背光條件下操作的,防范止荧光基团光降解。生理生理反映的佳pH值在8.3–9.0范围内,这时多巴胺伯胺始终处于环节去质子化的状态,亲核性不断增强,重要于与FITC的异硫氰酸酯产生偶联。生理生理反映工作温度通常情况调控在温度至37 ℃范围内,慎防止出现多巴胺的邻苯二酚节构被防钝化成多巴胺醌。若在酸碱性环镜中周期较长,多巴胺的邻苯二酚易产生自防钝化,由于实践时常在离氮气或氩气保养下去,并参与剂(如抗坏血酸、谷胱甘肽)防范副生理生理反映产生。在其实聚合具体步奏中,分类步奏为:最先将多巴胺酸洗盐溶解完在是碱性的降低乙酸丁酯中,调高至适合自己pH以裸露伯胺活力;马上又将FITC易溶极少量DMSO中,慢慢中滴加至少巴胺乙酸丁酯中,在攪拌生活条件下作用数钟头至隔夜。作用成功完成后,货物可用透析、抑菌凝胶脱水层析或HPLC溶合纯化,以取除未作用的FITC与多巴胺。终到的FITC-DA货物一般来说为黄浅黄绿色颗粒或乙酸丁酯,易溶水和地方有机化学乙酸丁酯中,包括过强的浅黄绿色荧光。在定性具体分析上,经常用的还包括UV紫外线-能看出光谱图具体分析和荧光光谱图具体分析查测,以效验FITC的光纤激光切割机的因素什么情况下恢复;质谱(ESI-MS或MALDI-TOF)在填写原子核量及偶联顺利完成;核磁检查现象(NMR)能促进具体分析硫脲键的确立;HPLC则在查测乙酰乙酸含量与分离FITC的除掉治疗效果。一些定性具体分析基础性填写了FITC-DA的组成与含量。总而言之,FITC-DA的获得依赖感于FITC异硫氰酸酯基团与多巴胺伯胺范围内的偶联反應,反應经济条件的体系化举例说明保护轻柔酸碱度、避免出现多巴胺自氧化反应及FITC的光降解。终有的FITC-DA颇具强荧光无线信号和多巴胺氧原子形态,能作为荧光探头适用于材质的表面掩盖、氧原子正常识别探析及感应器器建立中。

产品名称:FITC-DA,荧光素标记符号多巴胺

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