CAS:205391-01-1
DAF-2(CAS 号 205391-01-1)是 4,5 - 二氨基荧光素的繁衍物,核心理念功能性是是一腐蚀氮(NO)特喜欢的人荧光探头,应用在的检测工具微生物技术采集体系中 NO 的产生与质量浓度值变化规律,适应用在肿瘤上皮受损内部微生物技术学、生理问题学及药学学钻研。碳原子属性上,DAF-2 本身就无荧光,但其框架中的二氨基基团可与 NO 在o2会存在签发生环化响应,产生兼备强荧光的三唑荧光素繁衍物(DAF-2T),荧光激发起主可见光波长 495nm、导弹发射主可见光波长 515nm,荧光挠度与 NO 质量浓度值在一段范围内内(1-1000nmol/L)呈线性网络原因;且 DAF-2 兼备顺畅的肿瘤上皮受损内部彻底通透性,能便捷进到活肿瘤上皮受损内部,对肿瘤上皮受损内部毒素低(IC₅₀>10μmol/L),好活肿瘤上皮受损内部内 NO 的公交实时的检测工具。
提纯阶段需着重氨基维持性与的发应迟钝特喜欢的人:以 4,5 - 二氨基荧光素为材料,根据酰化的发应迟钝在氨基位点引用保護基团(如叔丁氧羰基,Boc),预防氨基朝后续的发应迟钝中被脱色;再根据某一装饰引用亲水性树脂基团(如羟基),缓和其水阴离子型,进而脱保護拥有 DAF-2。的发应迟钝中需严要求保持酰化免疫试剂消耗量(提高认识双氨基均被保護),脱保護的发应迟钝要在温润條件下来(如三氟乙酸 / 二氯甲烷气体组织体制),预防受到破坏荧光素女性格局。的发应迟钝后选择提纯型 HPLC 纯化,除去保護基团英雄碎片与副代谢物,并且用质谱(MS)和核磁嗡嗡声(¹³C NMR)效验团伙格局,另外需根据休外实验英文效验其对 NO 的积极地响应性(添加 NO 供体后荧光強度加强≥10 倍)。
app场境集合在 NO 探测邻域:在内部生物工程学调查中,可将 DAF-2 与内部孵育(37℃,30 30分钟),经由荧光显微镜或免疫印迹内部仪进行监测系统内部内 NO 的转化成 —— 假如调查宫颈炎症因素(如 TNF-α)多种多样下巨噬内部放出 NO 的动图全过程;在生活学调查中,可将 DAF-2 进入各种动物里面(如小鼠脑部开展),经由活体荧光三维成像洞察数据分享指定区域结构开展(如血液内皮、感觉脑神经结构开展)中 NO 的区域划分,数据分享 NO 在血液舒张、感觉脑神经预警电荷转移中的的功效;在临床药理学调查中,常用于分享药材对 NO 转化成的影向 —— 假如探测稳压药(如硝酸钠酯类药材)需不需要需要经由有助于 NO 放出发挥出的功效,或抗感染药需不需要需要经由阻止 NO 合酶(NOS)变少 NO 转化成;不仅,还常用于草木生活学调查,探测草木在困境(如大旱、病害害)因素下 NO 的變化,数据分享 NO 在草木抗逆现象中的监测的功效。
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