英文名称:FAM amine,6-isomer
FAM amine,6-isomer 是 6 - 异构体羧基荧光素(6-FAM)体现氨基(-NH₂)达成的荧光探头,价值体系功能性是进行与含羧基(-COOH)、活力酯(-NHS ester)等基团的动物制品制品氧原子核反應,达到特情人荧光记号,大范围图于免疫系统研究探讨分析、細胞激光散斑及动物制品制品氧原子核共同效用研究探讨。氧原子核属性上,6-FAM 女性使其符合良好的荧光安全性能 ——494nm 增加、518nm 释放,荧光量子成品率高(约 0.79),抗光氯漂意识强,且在 pH5.0-9.0 范围图内荧光网络信号保持可靠;氨基充当活力基团,可在偶联剂(如 EDC、DCC)效用下与羧基达成保持可靠的酰胺键,或真接与活力酯反應(必须偶联剂),反應具体条件和气(空调温度、生理上 pH),对动物制品制品氧原子核的发展空间构成与活力直接影响很小,适当脱贫记号。
提纯环节需重心调节异构体纯净度与氨基特异性:应当能够 化学上的结合提纯高纯净度 6-FAM,充分利用高效化高效液相色谱(HPLC)要从严溶合 5 - 异构体,确定 6 - 异构体纯净度≥98%(异构体杂乱会症状荧光屈服强度与箭头率);之后在 6-FAM 的羧基位点接入含氨基的联接臂(如乙二胺、1,3 - 丙二胺),能够 酰胺缩合症状转变成 FAM amine,6-isomer。症状中需调节联接臂的使用量(预防否则造成 多氨基化),症状保障体系需无水(以防止氨基水解作用),新线路闭光运行(预防 6-FAM 光解);症状后利用提纯型 HPLC 纯化,出掉未症状的 6-FAM 与联接臂,并且用质谱(MS)和核磁振动(¹H NMR)安全验证原子的结构 ——¹H NMR 中需现身氨基的特殊性峰(δ 2.8-3.2 ppm,-CH₂-NH₂质子),同一能够 紫外光分光光度计判断偶联率(A494/A280 测值≥0.6)。
适用动画场景包裹多方向动物标识:在免役荧光检查测量中,可标识含羧基的抗原或抗原,制作荧光在线探测器使用在要求大原子位置 —— 举例说明标识抗上皮生殖组织受损组织核黏附大原子(EpCAM)抗原,根据荧光显微镜考察癌肿生殖组织受损组织核接触面 EpCAM 的分布不均,捕助癌肿初步判断;在生殖组织受损组织核显像探讨中,可标识生殖组织受损组织核接触面的羧基化肾上腺素蛋清激酶(如 G 核蛋清偶联肾上腺素蛋清激酶),探测肾上腺素蛋清激酶在生殖组织受损组织核内的转运公司阶段,调查探讨生殖组织受损组织核信息除极机理;在动物大原子互为目的探讨中,可标识核酸配适体(含羧基表述),倡导荧光配适体感知器,根据荧光信息变(加强或淬灭)检查测量要求物(如癌肿因素物、天价属亚铁离子),检查测量精确度度可以达到 nmol/L 等级;还有就是,还可使用在核蛋清质组学探讨,标识含羧基的核蛋清质,根据荧光捕助凝露电泳(Fluorescence 2-DE)满足核蛋清质的破乳与判定,保驾护航调查探讨生殖组织受损组织核在各种人体生理情况下的核蛋清表述异同。
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