英文名称：Biotin-4-Fluorescein
Biotin-4-Fluorescein（菌物素 - 4 - 荧光素）是由菌物素（Biotin）与荧光素能够特定的衔接臂（4 位体现）偶联演变成的双工作原子核，本质工作是一起达成菌物原子核的特男人紧密联系与荧光示踪，多用做免疫力解析、人体细胞菌物学研究探讨及菌物原子核提取纯化。原子核形态上，该原子核兼备特征二者类物质的其优势：荧光素授予其强荧光功效 ——494nm 发挥、518nm 试射，荧光量子产出率高（约 0.92），抗光氯漂效果强，可能够荧光查重行为高速 位置总体最终目标原子核；菌物素则兼备对亲和素（Avidin）、链霉亲和素（Streptavidin）的良好人格魅力（解离常数 Kd≈10⁻¹⁵mol/L），紧密联系期间高速 、增强，不再 pH（4.0-9.0）、室内温度（4-37℃）及熟悉铁离子影晌，可达成总体最终目标原子核的特男人阻止与提取；衔接臂（4 位体现）的传入以免 了菌物素与荧光素之前的环境位阻，保持三者工作互不电磁干扰。
准备时候需统筹兼顾双成分几丁质酶氧与偶联稳界定性：一开始各纯化高含量菌物素与荧光素，有效确保安全菌物素含量≥99%（预防杂质残渣会影响亲和融入）、荧光素含量≥98%（做到荧光耐腐蚀性）；随着进行菌物素的羧基位点与荧光素的氨基位点（或反正），依据酰胺缩合反映，在 4 位连接方式臂的介导下实现了偶联。反映中需把控好菌物素与荧光素的摩尔比（1:1），预防多偶联物品转化成；在使用偶联剂（如 EDC/DMAP）提升 反映生产率，反映系统 pH 把控好在 7.5-8.5（有效确保安全双成分几丁质酶氧），全线阴凉操作步骤（放置荧光素光解）；反映后所采用准备型 HPLC（大分子运动相为甲醇 / 水）纯化，彻底清除未反映的菌物素与荧光素，然后用质谱（MS）和核磁震荡（¹H NMR）核实大分子空间结构 ——¹H NMR 中需同样会出现菌物素的噻吩环的特点峰（δ 4.3-4.5 ppm）与荧光素的苯环的特点峰（δ 7.0-7.8 ppm），同样依据紫外线分光光度计测得偶联生产率（A494/A280 测值≥0.8）。
运用画面集中点在 “融入 - 示踪” 双功效诉求这个领域：在免疫平台荧光检验中，能作为检验免疫试剂用作梦想抗原的科学研究分析与一酶联免疫法 —— 比如说先将菌物学素符号的一抗与样板中的抗原融入，多融入 Biotin-4-Fluorescein 与一抗的菌物学素融入，同样融入链霉亲和素包被的磁珠驯服联系物，在荧光检验既达到梦想氧分子式的拆分，又可在荧光难度一酶联免疫法抗原占比，提升检验敏感度度与合理性；在神经细胞膜菌物学学探析中，可符号神经细胞膜表层的菌物学素化感觉（如表皮层发芽因素感觉 EGFR），在荧光显微镜观查感觉的分布范围与内化工作，同样进行链霉亲和素磁珠拆分感觉联系物，科学研究分析感觉融入的在下游无线信号血清；在菌物学氧分子式拆分纯化中，可以用在作梦想血清的 “荧光示踪纯化”—— 将 Biotin-4-Fluorescein 与梦想血清融入后，在亲和层析柱（链霉亲和素包被）拆分，同样在柱后荧光检验实时更新监测技术梦想血清的过柱工作，防止获取漏掉或沉淀物吸进；不仅如此，还可以用在作活体成相探析，将其与癌症靶点质粒（如抗体阳性、肽）融入，在荧光成相观查质粒在爬行动物体内的的癌症丰度工作，同样进行菌物学素 - 亲和素平台达到癌症布位的食用的药物靶点递送，为癌症初步判断与开展供应立体式化机器。
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