CAS:510758-23-3
5 - 羧基荧光素叠氮化物(CAS 号 510758-23-3)是 5 - 羧基荧光素传入叠氮基(-N₃)组成的荧光电极,主导工作是用超链接普通机械症状(CuAAC 或 SPAAC)标签含炔基的怪物原子核,丰富广泛用于核酸标签、蛋白酶质示踪及内部怪物学研发。原子核的特点上,5-FAM 受精卵诠释其强荧光能力 ——494nm 提升、518nm 反射,荧光量子劳动生产率约 0.79,在 pH5.0-9.0 区间内荧光移动信号平衡可靠;叠氮基体积大小小、症状特女性朋友高,与炔基症状组成平衡可靠的三唑环,且不与怪材料内比较常见官能团(氨基、巯基)症状,对怪物原子核活性酶后果单纯形;一同,该电极水无水磷酸氢适用于(人体生理抗震液中融解度约 80μmol/L),适用于体内与活内部检测。
制作的过程需侧重于叠氮很健康可靠性与异构体纯净度:以 5-FAM 为主料,运行羧基滋养(如转成 NHS 催化活性酯)后与叠氮乙胺不起作用,接入叠氮基。不起作用需到空气流通橱中实行(防范叠氮化物挥发性),苛刻操控不起作用室温(0-10℃),放到叠氮基化解;纯化主要采用反相 HPLC(传递相为乙腈 / 水),提取 6 - 异构体与未不起作用主料,为了保证代谢物纯净度≥98%;运行红外光谱仪(IR)效验叠氮基表现形式峰(2100 cm⁻¹ 左古),并运行不稳明确性检测(37℃孵育 24 一小时,叠氮基抹去率≥95%)为了保证很健康运行。
应用不一样所覆盖多类动物原子核标注:在核酸标注中,可可以经过 CuAAC 表现标注含炔基的 DNA/RNA 探头,于荧光原位有性杂交(FISH)实践,测试染料体错误(如唐氏全方位的征的 21 号染料体三体),荧光预警强且背景图案低;在营养素质示踪中,可标注含炔基的资产重组营养素,可以经过荧光测试阐述营养素在上皮神经元内的表达爱与确定,如标注 GFP 深度融合营养素,观看其在上皮神经元器中的地理分布;在上皮神经元动物学探索中,可可以经过 SPAAC 表现标注活上皮神经元中有炔基的脂质,定位跟踪脂质在上皮神经元膜上的流量波特率,探索上皮神经元膜的流量性變化;不仅,还可于用量淘汰,标注含炔基的侯选人用量,可以经过荧光预警监测站用量与靶点营养素的依照环境,为用量活力鉴定打造高效性测试策略。
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