5-diacetate FAM DBCO（CAS 号 1889340-90-2）是 5 - 羧基荧光素的二乙酸酯随之出现物，的同时填补 DBCO 基团，中心工作是依据无铜点击量怪物学（SPAAC）标出含叠氮基的怪物原子核式，且二乙酸酯基团（-OAc）确立其 “荧光沉默不语” 属性，适宜于活肿瘤组织肿瘤生殖细胞内原位标出与荧光引起影像研究探讨。原子核式属性上，未电离反應前二乙酸酯填补 5-FAM 的荧光团，探头任何无荧光（荧光淬灭率≥95%），迈入肿瘤组织肿瘤生殖细胞后被酯酶电离反應取除乙酸酯基团，缓解压力出兼有强荧光的 5-FAM（494nm 引起、518nm 释放，量子劳动生产率约 0.78），构建 “靶向治疗引起” 荧光影像；DBCO 基团删去有效率 SPAAC 反應化学活化（与叠氮基反應冲结构力学常数约 10²-10³ L/(mol・s)），无铜反應对肿瘤组织肿瘤生殖细胞渗透性很低（IC₅₀＞50μmol/L），最合适活肿瘤组织肿瘤生殖细胞长时程洞察分析。
制取整个过程需合理安排二乙酸酯平稳性与 DBCO 生物：以 5-FAM 为塑料原材料，先确认乙酰化响应在羟基位点对接二乙酸酯基团（适用乙酸酐 / 吡啶保障体系），再在羧基位点与 DBCO - 胺确认 EDC/DMAP 催化氧化的酰胺缩合响应偶联。乙酰化响应需操纵温暖（0-5℃），避免出现过头乙酰化；DBCO 偶联需要在无水二氯二氧化氮中进行，一趟背光（可以防止 5-FAM 光解）；纯化用到矽胶柱层析（过柱剂为石油工业醚 / 乙酸乙酯）与反相 HPLC 相结合，以保证代谢物纯净度≥98%；确认红外光谱图检验二乙酸酯有特点峰（1750 cm⁻¹ 作用）与 DBCO 有特点峰（2200 cm⁻¹ 作用），并确认油脂蛋白质水解研究检验荧光系统激活高效率（油脂蛋白质水解后荧光抗拉强度提升自己≥50 倍）。
软件应用主要用途准确固定活細胞原位修改密码激光散斑：在細胞内蛋清示踪中，可标出含叠氮基的靶蛋清（如溶酶体蛋清 LAMP1），测试检测器步入細胞后仅在靶蛋清整合位点被溶解修改密码荧光，保证 靶蛋清的准确固定，可以减少散布测试检测器的题材干涉 —— 比如探究溶酶体在細胞内的运功曲线，荧光题材拉低 40% 左右；在活体恶性良性肺部淋巴良性淋巴肿瘤激光散斑中，可采用冠状动脉肌内注射标出含叠氮基的恶性良性肺部淋巴良性淋巴肿瘤靶点单单从表面抗原，测试检测器在恶性良性肺部淋巴良性淋巴肿瘤关键部位与单单从表面抗原整合并被恶性良性肺部淋巴良性淋巴肿瘤細胞酯酶修改密码荧光，保证 恶性良性肺部淋巴良性淋巴肿瘤的高特男人激光散斑，拉低没问题结构的荧光干涉；在細胞的电磁波电磁波的信号通路科学探讨中，可标出含叠氮基的的电磁波原子核（如 MAPK），采用荧光修改密码时序探究的电磁波原子核在細胞内的修改密码地位与动态图片发展，为的电磁波电磁波的信号通路国家宏观调控机理给出直观教学举证；另外，还常用于細胞间上下级效应科学探讨，标出其他細胞单单从表面的叠氮基原子核，采用荧光修改密码的电磁波探究細胞举例说明触的过程 （如免役細胞与恶性良性肺部淋巴良性淋巴肿瘤細胞的分辩整合），提生激光散斑的时间空间分辩率。
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