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RhodamineB-PEG-ConA,RB-聚乙二醇-刀豆球蛋白A的合成路线与步骤
发布时间:2025-09-15     作者:axc   分享到:
RhodamineB-PEG-ConA,RB-聚乙二醇-刀豆球核蛋白A的聚合行车路线与步驟

RB-聚乙二醇-刀豆球蛋白A是一类典型的荧光标记糖结合蛋白复合物,其基本构成包括三个部分:荧光染料Rhodamine B(RB)、柔性间隔臂聚乙二醇(PEG)以及糖结合蛋白刀豆球蛋白A(Concanavalin A, ConA)。Rhodamine B为常见的罗丹明类荧光染料,具有高量子产率、强烈的可见光吸收(λ_abs≈550 nm)与发射(λ_em≈570 nm),且在水溶液和生物环境中稳定性良好。PEG片段作为疏水染料与亲水蛋白之间的柔性间隔基团,能够有效减少空间位阻与疏水聚集,同时提升复合物的溶解性与生物相容性。ConA是一种四聚体植物凝集素,具有特异识别α-D-甘露糖和α-D-葡萄糖残基的能力,常用于糖生物学研究、细胞表面糖链探针及糖蛋白分离。通过在ConA上引入RB-PEG荧光标记,不仅保持其对糖基的结合活性,还赋予其荧光可视化功能,用于糖链成像、细胞识别和微阵列检测。

组成的路线与环节RB-PEG-ConA的制法可可以分为三种关健周期:①荧光颜料RB与PEG链的接;②带灵活性基团的RB-PEG延伸物的制法;③RB-PEG与ConA的偶联。RB-PEG前体转化成Rhodamine B碳原子结构大多数有效羧基(RB-COOH),可使用该羧基与氨基-PEG进行缩合反响。所用的PEG隔断臂碳原子结构为氨基-PEG-NHS或氨基-PEG-甲酯。以RB-COOH与氨基-PEG为起至物,成为EDC(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺)和NHS(N-羟基蜜腊酰亚胺)滋养羧基,生成RB-NHS酯两边体。那么与氨基-PEG想法,形成RB-PEG-NH2或RB-PEG-COOH等有化学活化末的荧光化PEG大分子。此具体步骤要在无水DMF或DMSO中实施,并在惰性惰性气体保障下想法,以防范电离。化合物可利用透析或柱层析纯化。RB-PEG亲水性化为利于后期与球脂肪酸ConA偶联,需将RB-PEG转为为活力性酯或具有刺激性可与赖氨酸侧链氨基化学反应的工作基团。惯用的办法还包括:将RB-PEG-COOH又一次完成EDC/NHS活性,绘制RB-PEG-NHS酯。或分为马来酰亚胺呈现PEG链终端,生成RB-PEG-MAL,用到与核蛋白巯基偶联。RB-PEG与ConA的偶联ConA蛋白质外面长期存在雄厚的赖氨酸残基氨基(–NH2),可与NHS酯形成酰胺键偶联。将纯化的ConA不溶PBS保护液(pH 7.4),恢复蛋清构象保持稳定。变慢放入RB-PEG-NHS盐溶液,平常在4 °C下温柔搅拌机影响数小时左右,防止出现过多突显造成的活性氧缺失。经过透析或妇科凝胶过滤水除去未反应迟钝的RB-PEG,能够 RB-PEG-ConA。若利用马来酰亚胺战略,则前须对ConA进行巯基化解决(如用Traut’s免疫试剂引用巯基),再与RB-PEG-MAL偶联。优缺点与适用终生成物RB-PEG-ConA为荧光糖结合起来血清电极,具备着以內特色:荧光机械性能非常好:RB电磁波敏感,是和显微显像和流式细胞验测。的结构柔性fpc线路板与稳定的性:PEG链影响血清外表面体现后的构象扰动,稳定ConA的糖构建几丁质酶。活性聊天通过:仍能判断多糖、糖蛋白质及组织细胞面糖链。采用的范围广:可以选择于糖怪物学分析、神经细胞质糖链成相、糖基判别阵列、药递送系统软件中的糖靶向治疗修饰语。按照适当合理设计制作PEG链长与RB标志比例图,可在保持稳定ConA生物的同时化荧光数据,兑换一些高迅敏度、特情人的糖链检测器。

产品名称:RhodamineB-PEG-ConA,RB-聚乙二醇-刀豆球蛋清A

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RhodamineB-PEG-ConA

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