CY3-Cholesterol，花菁纺织染料CY3图标胆固醇升高的合并步骤来设计

CY3-Cholesterol是一种通过将花菁染料CY3与胆固醇分子共价连接而得到的荧光标记衍生物，它兼具胆固醇的疏水性和膜锚定特性以及CY3染料的高荧光量子产率与强烈吸收-发射性能，在膜模拟体系、脂质体构建、细胞膜荧光探针等研究中具有重要应用价值。胆固醇分子由甾环骨架和3-位羟基组成，具有高度疏水性，易于嵌入脂质双层；CY3作为典型花菁染料，含有多甲烯链连接的吲哚类环结构，具有可见光区的强吸收（λmax约550 nm）与稳定的红橙色荧光（λem约570 nm）。通过在胆固醇的羟基或衍生位点引入连接基团，再与CY3活性酯偶联，可实现CY3-Cholesterol的结构构建。

人工的过程设计的概念CY3-Cholesterol的合出主要取决于利用胆固醇升高高3-羟基与CY3-NHS酯或CY3-羧酸具象化物左右的偶联反應。一般是步数以及：（1）胆固醇升高高的活力性装饰；（2）CY3染剂活力性酯的提纯或单独适用；（3）偶联反應；（4）纯化与研究方法。碳水化合物的掩盖：碳水化合物的C3位羟基是核心作用位点。方便提高自己作用学习效率，常将其与虎珀酸酐作用，出现碳水化合物-虎珀酸酯（Chol-Suc），该氧分子在碳水化合物甾环骨墙上传入了羧基，为后继的碱化与偶联带来手柄。CY3几丁质酶酯的做好准备：CY3多见的金融业研究物还有CY3-NHS酯或CY3-COOH。若为CY3-COOH，可用EDC/NHS安全体系滋养导致CY3-NHS酯，然后与蛋白质研究物中的羟基或氨基出现缩合体现。偶联发生体现：在无水DMF或DMSO中，将高胆固醇的食物-琥铂酸发展物与CY3-NHS酯混合式，在无刺激偏碱水平（如DIPEA）下发生体现，转化成平稳的酯键或酰胺键连到物。要想提高自己产出率，发生体现经常在高温或30 ℃下延续4–12小时左右，并保持着惰性气体保护区以不要颜料光降解。纯化步凑CY3-Cholesterol人工后需避开未体现的染剂与胆固醇升高衍生物物。最常用最简单的方法还有：总体办理：响应收场后，先用选转蒸馏排除相转移催化剂，混用水/无水乙醇沉淀物法总体取除未综合的低密度胆固醇。柱层析：通过硅胶材料柱或反相C18柱脱离。原因CY3局部有电、亲丙烯酸乳液聚氨酯具有，而热量骨架疏丙烯酸乳液聚氨酯较高，CY3-Cholesterol在反相色谱上的性与抹去日期处于二者间间，以便脱离。最常见流相为乙腈/水（含0.1%三氟乙酸）等度冲洗掉。HPLC纯化：为了让获取高饱和度货物，制作型HPLC是可用方法手段。纯化时候中，采用检侧550 nm释放峰风控货物冲洗掉情况下，提取相对馏分并冻干能够纯净版的CY3-Cholesterol。研究具体方法具体方法化合物当然认需不同表现：UV-Vis与荧光光谱分析：应了解到举例的CY3吸附峰（约550 nm）和发送峰（约570 nm），且荧光挠度改善，说染色剂持续完整详细光学元件机械性能。质谱（ESI-MS或MALDI-TOF）：可核定原子核量的扩大，关系证明蛋白质与CY3成功失败偶联。NMR（^1H与^13C）：甾环质子信息与CY3骨架的芬香氢信息一同导致，且对接基团的特殊性峰可以说，进一点核验机构。HPLC深入分析：检测工具某一主峰比例表以分析色度，普通的标准>95%。总结报告CY3-Cholesterol的制作而成及纯化环节展示出了荧光纺织染料与类固醇骨架的有用整合线路。利用在蛋白质C3羟基位点使用琥铂酸酯修饰语，再与CY3渗透性酶类酯偶联，要能稳定安全可靠导入荧光团。纯化环节中指明方向反相柱层析和分离纯化型HPLC可拿到高溶解度产品，定量分析然而则整合光谱图与质谱核对团伙机构。该制作而成路经不光提高认识了蛋白质的膜锚定形态，一同补齐了CY3的磁学渗透性酶类，为膜整治与荧光三维成像理论研究提供了了安全可靠交通工具。

产品名称：CY3-Cholesterol，花菁染剂CY3记号低密度胆固醇

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