CY3-Streptavidin，花菁染料CY3标记链霉亲和素的反应条件
CY3-Streptavidin，花菁纺织染料CY3记号链霉亲和素的影响情况
Cy3-Streptavidin是将花菁染料Cy3共价偶联至链霉亲和素（Streptavidin, SA）形成的荧光标记蛋白，用于生物检测、分子示踪和免疫分析。链霉亲和素是一种由四聚体蛋白组成的细菌来源蛋白，具有高亲和力和特异性结合生物素（Biotin）的能力（结合常数Ka≈10¹³–10¹⁵ M⁻¹），应用于生物标记、免疫检测、蛋白固定化及纳米技术研究。Cy3是一种红橙色荧光染料，吸光约550 nm，发射波长约570 nm，具有高量子产率和良好光稳定性。通过Cy3标记，链霉亲和素在保持生物素结合活性的同时，可实现荧光示踪，用于多种生物实验和分子成像研究。
发生反应先决条件化学反应道理Cy3有机染料常常以催化活力酯形态（如NHS酯）提拱，与链霉亲和素血清的赖氨酸侧链氨基突发亲核充当反馈，生成相对稳定的酰胺键。该共价偶联具体步骤应属于性情温和的血清质物理化学遮盖反馈，常常不可能危害血清的一级的结构或生物制品素通过催化活力。缓解标准选响应必须适合pH的下降液中来，以保持淀粉酶构成固定和氨基响应特异性。食用下降体系中为pH 7.4–8.5的聚磷酸盐下降液（PBS）或碳酸盐下降液（0.1 M NaHCO₃），pH过低会下降氨基的亲核性，而pH过高能够导至淀粉酶构象不固定或自聚积。下降液中尽量不要食用含胺类或硫醇类微生物培养基（如Tris、DTT、β-巯基酒精），预防与NHS酯相互竞争响应。Cy3与链霉亲和素摩尔比偶联反應普通应用Cy3与SA球淀粉酶酶质的摩尔比是3:1至10:1，可据必备标记图片图片相对黏度调低。低摩尔比可衡量球淀粉酶酶质菌物活力化，高摩尔比可增强荧光效果，但可能会影响球淀粉酶酶质叠折或菌物素根据本事。标记图片图片相对黏度普通可以通过太阳光的紫外线-可以看到光谱图测定方法Cy3吸光度与球淀粉酶酶质密度测值使用测试。溫度与日期管理响应在较高湿度（0–4℃）或在常温必备条件下去，一般而言持继1–4半小时。较高湿度可进一步保持良好蛋清动态平衡性，才能减少众多或挥发。延长的响应时段也许出现的非特喜欢的人偶联或蛋清地方性质发生变化。轻快搅匀可 保障响应均匀分布，逃避小面积的氧化还原电位过高出现蛋清众多。相转移催化剂与纺织染料析出Cy3-NHS酯需消融于极少量可挥发相转移催化剂（如DMSO或DMF）导致高酸度存储液，之后慢慢的添加水性聚氨酯血清质液体中，尽量不要可挥发相转移催化剂比率过高（一般来说不高出5%），以防止血清质转性。想法中止与纯化表现完工后，可按照建立甘氨酸或Tris缓存数据液结束未表现的渗透性酯。随后不久需出掉游走Cy3染色剂以有纯静的Cy3-Streptavidin，使用的办法涉及透析、妇科凝胶过虑色谱（如Sephadex G-25）或超滤膜。纯化整个过程中需保持维持温度和缓存数据液维持性，逃避蛋白酶降解。有机物不稳定量分析性与会自动储存纯化后的Cy3-Streptavidin可在PBS缓存数据液中安全会自动存储，并加盟低质量浓度防污剂（如0.02% NaN₃）放到微生态学造成的污染。阴凉保护于4℃中长时间食用，-20℃需用于长时间会自动存储。荧光能和生态学素整合灵活性在酌情环境下可始终维持月余至大半年。汇报总结Cy3-Streptavidin依据NHS酯风格的Cy3与链霉亲和素赖氨酸氨基共价偶联建立，体现需要在pH 7.4–8.5缓冲器液中低温环境轻搅拌机去，摩尔如果体现时间段需SEO以提高荧光难度和球蛋白质海洋微生物技术催化活性。体现成功后依据透析或抑菌凝胶过滤清洁清掉存在纺织染料，得到 高溶解度Cy3-Streptavidin。该荧光图标球蛋白质综合了Cy3可视化管理功能性与SA高亲和海洋微生物技术素综合性能指标，用途于免疫系统测量、原子示踪、荧光成相和海洋微生物技术食材图标等科学试验体系中。产品名称：CY3-Streptavidin，花菁染色剂CY3标识链霉亲和素
色度：95%+物理性质：固态物或溶剂贮藏前提条件：-20°C干躁遮光存放包装方式技术参数：50mg 100mg 250mg 500mg（按需保证）工厂：pg电子娱乐游戏app 怪物
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