Cy3-PE,花菁染料CY3标记磷脂酰乙醇胺的反应机理
Cy3-PE,花菁染剂CY3标出磷脂酰乙酸乙酯胺的生理反应生理机制
Cy3-PE是将花菁染料Cy3共价偶联至磷脂酰乙醇胺(Phosphatidylethanolamine, PE)形成的荧光标记磷脂,用于膜生物学、纳米载体研究及细胞膜成像。磷脂酰乙醇胺是细胞膜中常见的磷脂类组分,由甘油骨架、两个脂肪酸链和磷酸乙醇胺头基组成,具有两性亲水性和疏水性结构,可自组装形成脂质体、脂质双分子层或脂质纳米颗粒。Cy3是一种红橙色荧光染料,具有高吸光系数(λmax约550 nm)、高量子产率和良好光稳定性,通过与PE的头基偶联形成Cy3-PE,可在保持脂质膜性质的同时赋予荧光示踪功能。
的反应不可逆性的反应性质Cy3-PE的偶中国联通常按照NHS酯方式的Cy3染色剂(Cy3-NHS)或异硫氰酸酯方式(Cy3-ITC)与磷脂酰无水乙醇胺的氨基形成亲核抗衡想法,转成增强的共价酰胺键或巯基键产生物。该想法应属亲核抗衡想法(nucleophilic substitution),氨基有所作为亲核实验试剂普通攻击Cy3活力性酯碳原子团,故而控制荧光染色剂的共价进行连接。氨基活性酶与pH因素磷脂酰酒精胺的头基含分散伯胺,其氨基在正确pH能力下(pH 7.5–8.5)去质子化,成绩出很强的亲核性。NHS酯的碳基碳原子结构暗含地方正带电粒子,易由于氨基的亲核攻击速度进行酰胺键。在含酸性能力下,氨产品子化上升亲核性,化学反应使用率上升;在过碱能力下,NHS酯淀粉水解快速增长,生成二维码非活性酶类羧酸,上升偶联使用率。不良反应不可逆性步凑活性:Cy3-NHS酯所处硫酸铜溶液中时,NHS(N-羟基琥铂酰亚胺)当作离去基团,为碳水分子具备活性,使其易受亲核到攻击。亲核功击:PE氧分子头基的伯胺氮对NHS酯碳电子层时有发生亲核反攻,进行缓冲间态。离去基出走:NHS是离去基团脱轨,导出动态平衡的酰胺键,使Cy3共价结合实际至PE头基。此机理加强组织领导Cy3颜料与PE转变成相对稳定共价键,一同也不会被破坏皮下脂肪酸链及甘油骨架设备构造。液体与吸附经济条件的反馈普通在性生物碳容剂或混合着容剂机制(如氯仿/甲醇或DMSO/响应液)中实行,以 保障Cy3-NHS酯溶水良好的,一并PE分子结构可一致消减,防止出现自聚或凝固。水相的反馈时常利用脂质体浮悬液风格,确保氨基爆出于饱和溶液中以实行的反馈。湿度与时的反馈在高温或轻微不断升温环境下(25–37℃)参与,持继1–4分钟可完工大区域偶联。温过高会从而导致脂质氧化的或活性染料光降解,因为常需背光运行。轻微混合可切实保障稀硫酸均一,有利于的反馈做好参与。化合物平稳性添加的Cy3-PE分子式中,酰胺键稳定可靠,很不容易电离,荧光的性能提高优质。纯化后可在生产dmf溶剂或脂质体风险管理体制中長期包存,适宜于膜风险管理体制规则化和nm颗料标上。实验报告功用用Cy3箭头,PE分子式可在脂质双重、脂质体或脂质納米粒子中可视化数据,方便于膜结合、膜发动机学、納米各种载体匀称及人体细胞质显像深入分析。想法分析进展明确责任且进行操作状况温文尔雅,可 保障脂质生物学成分和荧光安全性能权衡,谋生物生物学和納米医疗深入分析提拱耐用方式。汇报总结Cy3-PE按照Cy3活性酶类酯与磷脂酰甲醇胺头基氨基发现亲核成为现象演变成可靠酰胺键,实行荧光记号符号。现象原理还有NHS活性、亲核到攻击和离去基着步凑,需要在pH 7.5–8.5缓冲区指标体系下高低温轻均匀搅拌参与,确认PE分子式和Cy3颜料组成部分完成。提取的Cy3-PE软件应用于膜菌物学、奈米药材媒体研究分析及组织膜影像,为生物现象制度解析视频和作用化脂质记号符号供应了根本实验性app。产品名称:Cy3-PE,花菁颜料CY3标记图片磷脂酰无水乙醇胺
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