Alexa Fluor 488 TCO(AF488 反式环辛烯)是一种荧光标记的反式环辛烯(TCO)衍生物,结合了绿色荧光染料Alexa Fluor 488与反式环辛烯(trans-cyclooctene,简称TCO)分子。TCO是一种特殊的化学基团,具有高反应性,能够与另一种化学基团—环辛烯(DIBO)—发生快速且高选择性的点击反应。AF488是一种荧光染料,其激发波长为495 nm,发射波长为519 nm,具有较高的亮度、较长的荧光寿命和较低的光漂白特性。
其主要因素荧光特性:
Alexa Fluor 488(AF488)是绿色荧光染料之一,具有较高的量子产率和较长的荧光寿命。其激发波长为495 nm,发射波长为519 nm,适合在多重标记实验中与其他染料一同使用。由于其强烈的荧光特性,AF488在荧光显微镜和流式细胞术中被广泛应用。
高效的点击化学反应:
反式环辛烯(TCO)是一种常见的点击化学试剂,能够与另一种具有反应性的化学基团(如DBCO,双苯并环辛烯)快速反应,形成稳定的共价键。该反应具有极高的反应性和选择性,在无催化剂的条件下可以在水溶液中进行。AF488 TCO作为一种标记分子,可以在不影响其他分子结构的情况下,快速与带有DBCO基团的分子发生反应,从而实现荧光标记。
生物兼容性与低毒性:
AF488 TCO标记分子对细胞的生物兼容性较好,且对细胞功能的干扰较小,因此适用于活细胞成像、细胞标记以及其他生物实验。其绿色荧光特性使其成为细胞标记、活体成像和药物输送等实验中的重要工具。
适用于多重标记实验:
AF488 TCO的绿色荧光信号与其他常见的荧光染料(如Cy5、Cy3等)具有明显的分离波长,可以与其他荧光标记物一起进行多重标记实验。这使得AF488 TCO成为多重检测、共聚焦显微镜、流式细胞术等实验中的理想选择。
细胞标记与追踪:
AF488 TCO常用于细胞标记和追踪实验。通过将AF488 TCO与含有DBCO基团的分子或抗体结合,研究人员可以对特定细胞或组织进行荧光标记。AF488 TCO的绿色荧光特性使其在细胞成像中具有较高的可视性,能够帮助研究人员观察细胞迁移、细胞内分子动态变化等。
分子探测与成像:
在分子探测中,AF488 TCO可用于与带有DBCO基团的靶分子进行标记反应。通过荧光信号,研究人员可以定量检测靶分子的存在、分布及其与其他分子的相互作用。例如,在药物靶点研究中,AF488 TCO能够帮助研究人员分析药物在细胞内的分布及其与靶分子的结合。
生物分子相互作用分析:
AF488 TCO常用于研究生物分子间的相互作用。通过与DBCO标记的蛋白质、核酸或其他生物分子反应,AF488 TCO能够实现高效的荧光标记。这种标记方式有助于研究分子间的结合动力学、配对特性及分子定位。
活体成像与动态观察:
由于AF488 TCO的绿色荧光特性,它也适用于活体成像。研究人员可以利用其标记特定分子,并在动物模型中进行动态观察,实时监测分子在体内的分布、代谢和运输过程。AF488 TCO为生物医学领域中的药物开发和临床前研究提供了新的技术手段。
药物输送研究:
AF488 TCO可应用于药物输送系统的研究。通过将药物分子与含有DBCO基团的载体结合,并用AF488 TCO进行标记,研究人员能够追踪药物在体内的分布和释放过程,评估药物输送系统的效果和安全性。这一应用在癌症治疗、基因治疗以及疫苗开发中具有潜力。