CY5.5-E2，花菁染料CY5.5标记雌二醇的合成思路
CY5.5-E2，花菁纺织染料CY5.5标注雌二醇的聚合难点
CY5.5-E2 是一种将甾体激素雌二醇（E2, 17β-estradiol）与花菁染料CY5.5偶联得到的近红外荧光探针。雌二醇分子为甾体骨架，分子式C18H24O2，具有典型的甾体四环结构，并含有C3和C17位置的两个羟基官能团，具有较强的亲核性和化学修饰潜力。CY5.5则是具有强烈近红外荧光发射的花菁染料，激发波长在675 nm左右，发射波长约695–710 nm，具有较低自发荧光干扰和较高组织穿透能力。通过将雌二醇与CY5.5偶联，得到的CY5.5-E2兼具甾体分子的结合特性与光学可视化能力，可作为雌激素相关研究中的光学示踪探针。
生成要点致使雌二醇有两个人羟基，在其中C3位苯环上的酚羟基吸附性氧更好，常作偶联位点。CY5.5常以开朗酯（如CY5.5-NHS ester）或相关研究化注意形式给予反应迟钝吸附性氧基团。聚合理念注意有两只：间接将雌二醇的羟基与CY5.5活泼开朗酯不良反应，建立酯键或碳酸酯键；实行机遇当中插头（如琥铂酸酐、PEG linker）先对雌二醇羟基实行突显，再与CY5.5-NHS偶联。二是种方案经常用于提升 水无水磷酸氢与面积机灵性。生成具体步骤概括雌二醇活性呈现称取過量雌二醇，不能溶解无水吡啶或DMF盐溶液中。向化学反應液中加入适量琥铂酸酐（Succinic anhydride）及离子液体剂（如DMAP），在恒温或略提温（25–40 ℃）的条件下化学反應数几小时，使C3位羟基被突显制成雌二醇-半琥铂酸酯（E2-succinate）。粗乙酰乙酸经乙酸乙酯浓缩后，用硅胶材料柱纯化赢得含有羧基的E2诞生物。该过程的关健是确定性地淡化C3羟基，而保存C17羟基的完整的性。雌二醇-纯化酯准备将E2-succinate易溶无水DMF中，加盟EDC·HCl与NHS，反响数时间以将终端羧基转变为轻快酯（E2-succinate-NHS ester）。该方法步骤形成的里面体含有较高的生理反应渗透性，需要符合无水、闭光情况下而短时间内食用，避开蛋白质水解解离。与CY5.5偶联将CY5.5-amine 或 CY5.5中含伯胺基团的繁衍物溶水DMF，慢慢引入E2-succinate-NHS ester盐溶液，在偏碱性缓冲器（如DIPEA都存在下）反應。能够酰胺键联接改变雌二醇与CY5.5的共价偶联。此的反应往往需混和12–241天，做到遮光必要条件预防止纺织染料光氯漂。反馈截止后，粗物品经旋蒸弄掉溶液，再溶水于甲醇/水混液，做出教学过程除盐处置。纯化将粗终产物经反相C18柱层析或制作型HPLC纯化，安全使用水（含0.1%三氟乙酸）/乙腈等度过柱。CY5.5极强的近红外获取性能特点可在675 nm在线检测副产物峰。纯化后采集而来各自混合物，冻干到CY5.5-E2碎末状碎末，大多数呈深红或紫灰色。定量分析UV-Vis光谱分析：突然出现CY5.5特殊性释放峰（~675 nm）与雌二醇紫外线释放峰（~280 nm），讲解两者之间根据。荧光光谱仪：发挥光波长675 nm，卫星发射在695–710 nm直接，始终维持CY5.5基本特性。质谱（MALDI-TOF或ESI-MS）：原子铁离子峰分别的理论原子量，验证偶联取得胜利。NMR（¹H, ¹³C）：雌二醇骨架的甾体数字无线预警与有机染料馨香数字无线预警均可查测到，C3位羟栽培基质子数字无线预警会消失，描述偶联时有发生。HPLC研究分析：单一化的峰认定书饱和度>95%，适于生物制品试验操作。归纳总结CY5.5-E2的配制重点构成这三个阶段中：雌二醇羟基的琥铂酰化掩盖、羧基的NHS活性或是与CY5.5的酰胺键偶联。该炼制路径不光有保障了甾体骨架的删改性，还进行接入挠性连入臂改善了测试探针的不稳性和水可溶。纯化根据于配制型HPLC，分析方法相组合光谱分析学和质谱，终兑换高含量的CY5.5-E2，为研究方案雌雄激素相组合时与分布区给予数据可视化软件工具。产品名称：CY5.5-E2，花菁染色剂CY5.5标注雌二醇
含量：95%+特性：粉状或液滴存储状态：-20°C太干遮光导出产品包装型号：50mg 100mg 250mg 500mg（按需给出）企业：pg电子娱乐游戏app 生物体
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